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耐辐射关键蛋白DrRRA及变形链球菌smu.595蛋白的结构和功能研究
中文名称: 耐辐射关键蛋白DrRRA及变形链球菌smu.595蛋白的结构和功能研究
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论文编号: 4143386收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: 无英文名称
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 分子遗传学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 变形链球菌 耐辐射球菌 嘧啶代谢从头合成途径 双组分系统
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文摘要: 本论文主要包括两方面的内容:来自耐辐射球菌DNA修复相关的关键蛋白DrRRA的结构和功能的研究以及来自变形链球菌的smu.595的结构研究. 耐辐射球菌(D.(略)durans R1)具有卓越的耐辐射,抗氧化,抗干燥的能力,即使受到大剂量的电离辐射,它仍能高效修复DNA,重建染色体.在我们所研究的D. radiodurans R1一组DNA修复蛋白中,DrRRA具有双组分系(略)component system,T(略)--反应调控蛋白的结构功能特征,和多种DNA修复基因的表达调控相关.TCS的发现和研究已近20余年.它主要存在于真菌,古菌中.整合到信号转导通路中的TCS,通过刺激-反应偶联机制,使生物体可感知外界环境的变化,并做出相应的反应.原核生物中典型的TCS由两个组分构成:组氨酸蛋白激酶(HK, his(略) protein kinase)和反应调控蛋白(RR, res(略)regulator protein).HK感知胞外刺激自磷酸化后,将一个磷酰基转移到RR上,接着RR再引发下游通路的特异反应.我们对DrRRA的研究主要取得了以下成果:大量表达了正确的DrRRA...
This thesis contains two parts:the structural and function(omitted) of DrR(omitted)radiodurans R1 and the structural studies of a putative dihydroorotate dehydrogenase (DHOD) from S. mutans. Two-component systems are predominant signal transducti(omitted)s in prokaryotes, and also exist in man(omitted)as well as some eukaryotes. A typical TCS consists of a histidine kinase and a cognate response regulator. DrRRA has been identified to be es(omitted)r the extreme radioresistance of D.radiodurans R1 a...
目录:
摘要第2-4页
Abstract第4-5页
第一部分 来自耐辐射球菌DrRRA蛋白的结构和功能的研究第8-96页
  ·. 引言第8-29页
    ·耐辐射球菌的研究进展第8-12页
    ·双组分系统的研究进展第12-19页
    ·DrRRA的研究进展第19-21页
    ·蛋白质晶体学原理和方法第21-27页
    ·本课题的目的和意义第27-29页
  ·. 实验材料和方法第29-53页
    ·实验材料和仪器第29-37页
    ·重组质粒构建第37-40页
    ·重组质粒的蛋白质表达第40-41页
    ·重组质粒的蛋白质纯化第41-44页
    ·蛋白质-核酸相互作用------凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)第44-45页
    ·蛋白结晶和数据收集第45-50页
    ·晶体结构解析和模型修正第50-51页
    ·小角散射技术(Small Angle X-ray Scattering,SAXS)第51-52页
    ·常用软件及网站第52-53页
  ·. 结果和讨论第53-85页
    ·DrRRA蛋白质表达第53-55页
    ·DrRRA蛋白质纯化第55-59页
    ·DrRRA晶体筛选第59-61页
    ·晶体衍射数据的收集第61-65页
    ·晶体结构解析及结构模型的修正第65-67页
    ·晶体结构分析和比较第67-72页
    ·DrRRA和EcPhoB-DNA复合物的结构比较第72-74页
    ·凝胶迁移实验证明构象的取向影响DrRRA和DNA的结合第74-77页
    ·同步辐射小角散射研究DrRRA在溶液中的构象第77-85页
  ·. 结论部分第85-87页
  参考文献第87-96页
第二部分 来自致龋变形链球菌的二氢乳清酸脱氢酶酶的结构研究第96-127页
  ·. 引言第96-110页
    ·核苷酸的生物合成第96-104页
    ·二氢乳清酸脱氢酶家族第104-108页
    ·来自于变形链球菌的蛋白质smu.595的结构研究第108-109页
    ·本课题的目的和意义第109-110页
  ·. 实验材料和实验方法第110-113页
    ·克隆表达第110页
    ·蛋白纯化第110-111页
    ·还原性赖氨酸甲基化第111页
    ·smu.595蛋白结晶和数据收集第111页
    ·smu.595晶体结构解析和模型修正第111-113页
  ·. 结果和讨论第113-124页
    ·smu.595蛋白质克隆表达和纯化第113-114页
    ·smu.595蛋白结晶和数据收集第114-117页
    ·smu.595蛋白晶体结构的解析和修正第117-119页
    ·smu.595的整体结构第119页
    ·赖氨酸甲基化修饰对smu.595结晶的影响第119-124页
  参考文献第124-127页
发表文章第127-128页
致谢第128-129页
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