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噬菌体展示技术筛选藻毒素结合多肽、毒素调查及甲藻钙调蛋白基因的研究
中文名称: 噬菌体展示技术筛选藻毒素结合多肽、毒素调查及甲藻钙调蛋白基因的研究
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论文编号: 4143166收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Screening Ligands of Microcystin by Phage Display Technique、microcystin Survey and Preliminary Study on Calmodulin Gene in Dinoflagellate
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 海洋生物学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 噬菌体展示 微囊藻毒素 钙调蛋白 甲藻
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文摘要: 近年来,随着全球范围内有毒藻华发生次数的增加,对人类危害程度的加剧,有毒赤潮已成为一个全球性的环境问题受到人们的普遍的关注.相关的研究如藻华与环境因素的关系、对生态系统的危害、藻(略)种鉴定等方面都已取得了较多研究成果.分子生物学技术以其快速、简易及高灵敏度等特点,已经越来越多的被应用于藻毒素及藻种定性、定量的分析.另一方面,对赤潮藻生长增殖及对环境因子响应的(略)究有利于更好的检测及预报赤潮的爆发,这方面的研究也逐渐受到人们的重视.本文利用噬菌体展示技术、酶联免疫方法(ELISA)和荧光定量PCR的方法,对水体中藻毒素,特别是微囊藻毒素的分子检测和赤潮藻生长增殖、应(略)进行了研究. ⒈利用噬菌体展示随机十二肽库对微囊藻毒素进行亲和筛选.(略)噬菌体克隆回收率从2×10-5增加到3.7×10~(-2),目标噬菌体克隆得到了有效富集.从第四轮和第五轮所筛选到的噬菌体克隆中随机挑取70个噬菌斑,使用酶联免疫法检测其单克隆的特异性,结果显示63个克隆为强阳性.(略)0个克隆进行序列分析,结果显示多肽序列没有明显的一致性,但富含色氨酸小的基序在9个克隆中均出现,表明色氨酸可能...
Over the last several decades, harmful algal blooms (HABs) have emerged(omitted)al concerned environmental problem due to (omitted)ting trend in occurrence and great threat to health of wildlife and human. Multidisciplinary researches ranging fro(omitted)r and cell biology to large-scale field surveys, numerical modeling, and remote sensing (omitted) are conducted to study HABs. Due to their virtues of rapid analysis speed and high sensitivity, emerging molecular techni(omitted)been more and more appli...
目录:
摘要第5-7页
Abstract第7-9页
1 文献综述第13-37页
  ·有害藻华的研究进展第13-23页
    ·有害藻华简介第13-14页
    ·蓝藻水华的发生及危害第14-17页
    ·有害赤潮及其危害第17-23页
  ·微囊藻毒素及其检测技术第23-27页
    ·微囊藻毒素概述第23-25页
    ·微囊藻毒素检测的手段第25-27页
  ·噬菌体展示技术及其应用第27-32页
    ·噬菌体展示技术简介第27-30页
    ·噬菌体展示技术的应用第30-32页
  ·钙调蛋白研究进展第32-35页
    ·钙调蛋白(calmodulin,CaM)结构第32-33页
    ·植物中钙调蛋白亚型第33-34页
    ·钙调蛋白的功能第34-35页
  ·本论文的研究意义和内容第35-37页
2 噬菌体展示肽库筛选微囊藻毒素结合肽克隆及分析第37-63页
  ·材料和方法第37-50页
    ·试剂第37-38页
    ·主要溶液的配置第38页
    ·主要仪器第38页
    ·实验方法第38-50页
  ·结果第50-60页
    ·合成微囊藻毒素与小牛血清蛋白偶联物(MC-LR-BSA)第50-51页
    ·利用噬菌体展示随机十二肽筛选微囊藻毒素结合多肽第51-60页
  ·讨论第60-62页
  ·小结第62-63页
3 夏季佛罗里达州中北部微囊藻毒素在淡水生态系统中的分布及其与环境因子间的关系第63-77页
  ·材料和方法第63-67页
    ·实验材料和试剂第63页
    ·实验仪器第63-64页
    ·采样点设置及采样方法第64-66页
    ·微囊藻毒素含量的测定第66页
    ·叶绿素浓度测定第66-67页
    ·溶解态营养盐及总氮磷浓度测定第67页
    ·藻蓝蛋白浓度的测定第67页
    ·数据分析第67页
  ·结果第67-75页
    ·夏季佛罗里达州中北部微囊藻毒素的分布第67-69页
    ·夏季佛罗里达州中北部叶绿素的分布第69-70页
    ·夏季佛罗里达州中北部溶解态营养盐和总氮总磷的分布第70-72页
    ·夏季佛罗里达州中北部藻蓝蛋白的分布第72-73页
    ·影响微囊藻毒素分布的主要环境因子第73-75页
  ·讨论第75页
  ·小结第75-77页
4 亚历山大藻钙调蛋白基因的克隆鉴定及对细胞生长和热胁迫的表达分析第77-100页
  ·材料第78-79页
    ·实验材料第78页
    ·实验试剂和溶液第78页
    ·实验主要仪器第78-79页
  ·方法第79-87页
    ·Alexandrium catenella 钙调蛋白基因cam 的克隆及分析第79-85页
    ·荧光定量PCR 检测A.catenella 不同生长时期cam 基因的表达第85-87页
    ·荧光定量PCR 检测热激条件下A.catenalla cam 基因表达第87页
  ·结果第87-96页
    ·A.catenella 钙调蛋白基因cam 序列的克隆第87-89页
    ·A.catenalla 钙调蛋白CaM 序列分析第89-92页
    ·Real-Time PCR 检测A.catenella 不同生长时期cam 基因的表达第92-95页
    ·cam 基因对热激的响应第95-96页
  ·讨论第96-98页
    ·A.catenella 钙调蛋白基因cam 的克隆及序列分析第96-97页
    ·cam 基因在A.catenella 生长时期的表达变化第97-98页
    ·A.catenella cam 基因对热胁迫的响应第98页
  ·小结第98-100页
5 本文的创新点及工作设想第100-101页
参考文献第101-121页
致谢第121-122页
个人简历第122页
发表的学术论文第122-123页
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