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内蒙古螺旋藻热激蛋白基因的克隆及转化体系的初步研究
中文名称: 内蒙古螺旋藻热激蛋白基因的克隆及转化体系的初步研究
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论文编号: 4141293收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: HSP Gene Cloning and Transformation System Study of Spirulina. Innermongoliansis
学位类型: 硕士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 农产品加工与贮藏
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 内蒙古螺旋藻 抗热 热激蛋白 穿梭表达载体 三亲接合
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文摘要: 内蒙古螺旋藻(S. innermongoliansis)是一种原产于内蒙古碱湖、品质优良、中温适应型的螺旋藻,但因发现较晚,生长环境特殊等原因,对其分子遗传学等基础研究(略)高其耐热性能够扩大养殖范围,降低养殖成本,对实际生产具有很大的应用价值. 研究表明热激蛋白在藻类抗高温胁迫中起着重要作用.本研究采用PCR技术克隆了内蒙古螺旋(略)的3个基因:HSP70、HSP90和DnaJ2,对基因及其编码蛋白序列和进化关系进行了初步分析,表明目的基因克隆成功. 从内蒙古螺旋藻中克(略)-藻蓝蛋白基因的启动子BetaP,这是一种螺旋藻自身的组成型强启动子,经实验证明具有很强的启动作用. 以pBLUNT为出发质粒,构建了三亲接合转移表达载体,选择组成型强启动子BetaP,在基因5’端添加了SD序列(GGAGAG),并调整SD序列与起始密码子ATG(略)碱基,连接目的基因DnaJ2.三亲接合表达载体在大肠杆菌中进行了成功表达,表达载体pACYC-BB构建成功.随后进行了一系列内蒙古螺旋藻转化实验,对三(略)化条件进行了摸索,积累了一些宝贵经验.目前,内蒙古螺旋藻的转基因研究还...
ABSTRACT Spirulina. innermongoliansis is a high quality and(omitted)mperature adaptive variety, which was found in salt lake in Inner Mongolia. Because of its later discovering(omitted)and its sp(omitted)ng conditions and other related reasons, S. innermongoliansis have not be widely studied and exploited in Molecular Genetics. To improve its heat resistance (omitted) its breeding range and reduce the farming costs has a great value in practical productio(omitted) researches show that heat shock pro...
目录:
摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
1. 前言第8-20页
  ·蓝藻基因转化体系第8-13页
    ·蓝藻基因表达载体第9页
    ·蓝藻转化方法第9-11页
    ·转化子的筛选第11页
    ·限制性内切酶对转化效率的影响第11-12页
    ·螺旋藻基因转录调控第12-13页
  ·蓝藻抗热机理第13-18页
    ·抗氧化系统第13-15页
    ·热激信号转导第15-16页
    ·热激蛋白第16-17页
    ·其他因子对高温胁迫的响应第17-18页
  ·螺旋藻转基因存在的问题第18-20页
2. 材料与方法第20-34页
  ·实验材料第20-21页
    ·质粒、菌株与螺旋藻株第20-21页
    ·本实验所用工具酶与试剂第21页
  ·实验方法第21-34页
    ·培养基及实验试剂的配制第21-22页
    ·螺旋藻的培养与抗性筛选第22-24页
    ·目的基因的克隆与改造第24-26页
    ·三亲接合转移表达载体的构建第26-30页
    ·目的基因功能的鉴定第30-32页
    ·三亲接合表达载体转化内蒙古螺旋藻第32-34页
3. 结果与分析第34-52页
  ·目的基因的克隆与生物信息学分析第34-46页
    ·HSP90基因克隆与分析第34-38页
    ·DnaJ2基因克隆与分析第38-42页
    ·HSP70基因克隆与分析第42-46页
  ·Bom序列的克隆第46-47页
  ·内蒙古螺旋藻对常见抗生素的基础抗性第47页
  ·三亲接合转移表达载体的构建第47-48页
    ·中间表达载体的构建第47-48页
    ·穿梭表达载体的构建第48页
  ·DnaJ2的基因功能鉴定第48-49页
    ·DnaJ2基因的诱导表达第48-49页
    ·DnaJ2基因功能的鉴定第49页
  ·内蒙古螺旋藻转基因的探索第49-52页
    ·启动子的选择第49-50页
    ·内蒙古螺旋藻的转化第50-52页
4. 结论与讨论第52-54页
参考文献第54-58页
个人简介第58-60页
导师简介第60-62页
获得成果目录清单第62-64页
致谢第64页
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