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大茂山苏云金芽孢杆菌的分离、鉴定及杀虫基因的克隆
中文名称: 大茂山苏云金芽孢杆菌的分离、鉴定及杀虫基因的克隆
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论文编号: 4141193收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Isolation and Identification of Bacillus Thuringiensis and Cloning of Insecticidal Genes from Damaoshan Mountains
学位类型: 硕士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 农业昆虫与害虫防治
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 苏云金芽孢杆菌 PCR-RFLP 基因克隆 生物活性
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文摘要: 苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是目前世界范(略)泛,的一种生防微生物,对人畜及非靶标昆虫无害,具有巨大的经济价值和生态价值.为了克服害虫抗性发生、Bt杀虫图谱窄等问题,筛选具有高效杀虫活性的新型Bt基因就具有了非常重要的现实意义. 本研究选取河北省大茂山地区为土壤样品采集地区,以地表以下5公分的腐殖土作为采集对(略)海拔高度,共采集土壤样品784份,利用温度-抗生素筛选法分离得(略)菌株.显微观察结果表明这些菌株的伴孢晶体包括菱形、圆形、方形、椭圆形、不规则形等多种形态,充分体现了大茂山地区Bt资源的丰富及多样性. 采用PCR-RFLP体系对分离获得的76株分离菌株进行基因鉴定,结果发现含有cry1、cry2、cry3、cry8、cry9、cry26、cry1I和vip共8种基因型(略)cry8类基因的菌株最多,有34株,另外12株包含有cry1类基因,5株包含有(略)因、2株包含有cry3类基因、7株包含有cry9类基因、6株包含有cry26类基因、11株包含有cry1I类基因,3株包含有vip基因.在基因组合方面,cry8+c...
Bacillus thuringiensis (Bt) has been widely used in the world as a (omitted)o-control microbial. For harmless to persons, animals and the non-target insects, Bt possess huge economic(omitted) ecological value. In order to resolve a series of problems just li(omitted)sistances occurrence or narrow-spectrum of insecticide, screening of new Bt strains w(omitted)nsecticidal activity become very important. In this research, 76 Bt stains (omitted)ted from total 784 soil samples which were collected from t...
目录:
摘要第5-7页
Abstract第7-8页
1 引言第11-28页
  ·苏云金芽孢杆菌简介第11页
  ·苏云金芽孢杆菌的生物学特性及其分布第11-12页
  ·苏云金芽孢杆菌的分离第12-13页
  ·苏云金芽孢杆菌的杀虫毒素第13-14页
    ·苏云金芽孢杆菌杀虫毒素的分类第13页
    ·苏云金芽孢杆菌杀虫毒素的结构及其功能第13-14页
    ·苏云金芽孢杆菌毒素的杀虫作用机制第14页
  ·苏云金芽孢杆菌的杀虫基因第14-18页
    ·苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因的分类及命名第14-16页
    ·苏云金芽孢杆菌基因的鉴定方法第16-18页
  ·苏云金芽胞杆菌杀虫基因与生物活性之间的关系第18-26页
  ·苏云金芽孢杆菌在转基因植物中的应用与发展第26-27页
  ·本研究的目的和意义第27-28页
2 材料与方法第28-41页
  ·实验材料第28-32页
    ·土壤样品第28页
    ·培养基第28-29页
    ·引物序列第29-30页
    ·主要使用试剂第30-32页
    ·所使用仪器设备第32页
    ·供试昆虫第32页
  ·研究方法第32-41页
    ·采用温度-抗生素法筛选苏云金芽孢杆菌第32页
    ·模板制备第32-33页
    ·PCR 反应体系及程序第33-34页
    ·酶切分析第34页
    ·PCR-RFLP 鉴定体系第34-37页
    ·DNA 回收第37-38页
    ·连接反应第38页
    ·转化反应第38页
    ·重组质粒的筛选和鉴定第38-39页
    ·序列测定及分析第39页
    ·SDS-PAGE 蛋白电泳分析第39页
    ·苏云金芽孢杆菌生物活性测定第39-41页
3 结果与分析第41-72页
  ·菌株分离结果第41-42页
  ·菌株镜检观察结果第42-46页
  ·基因型鉴定第46-55页
  ·新基因的鉴定与克隆第55-64页
    ·菌株TDM-19 的鉴定及部分序列的克隆第55-57页
    ·菌株FB-32 中全长基因的克隆第57-64页
  ·生物活性测定第64-72页
    ·对鳞翅目昆虫的生物活性测定第64-68页
    ·对鞘翅目昆虫的生物活性测定第68-72页
4 讨论第72-74页
5 结论第74-75页
参考文献第75-81页
致谢第81-82页
在读期间发表论文第82页
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