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小分子化合物J2作用于大鼠角膜细胞的体外及体内实验研究
中文名称: 小分子化合物J2作用于大鼠角膜细胞的体外及体内实验研究
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论文编号: 4133398收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Effect of A Small Molecule Compound J2 on Corneal Cells of Rat in Vitro/Vivo
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 眼科学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 小分子化合物J2 原子力显微镜 角膜上皮细胞 角膜内皮细胞 CD4~ T淋巴细胞
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论文摘要: 目的: 通过原代培养获得SD大鼠角膜上皮细胞及内皮细胞,应用MTT检测方法研究小(略)2对角膜上皮/内皮细胞(略)运用流式细胞分析技术检测小分子化合物J2作用后角膜上皮/内皮细胞膜表面CD80分子表达的变化情况,同时应用原子力显微镜观测该化合物对角膜上皮/内皮细胞膜表面超微结构的影响.建立大鼠角膜移植动物模型,在体内观测小分子化合物J2抗移植排斥反应的效果,应用AFM观测该化合物对角膜内皮层细胞超微结构的影响. 方法: 1、5只SPF级SD大鼠,2%戊巴比妥钠按0.2ml/100g,腹腔麻醉.完整摘除健康大鼠眼球,取下角膜上皮/内(略)贴壁消化培养法培养角膜上皮/内皮细胞,经免疫组织化学方法鉴定. 2、按照MTT比色实验步骤,接种细胞于96孔培养板,培养过夜后,加入小分子化合物J2,于不同观测时间((略)20min,30min, 1h,(略)8h,16h,32h,48h),终止实验,每板均设空白对照孔,选择490nnm波长,在酶联免疫检测仪上测定各孔光吸收值,记录结果.所选实验终止点结束时,对不同观测时间的角膜上皮/内皮细胞应用透射电镜观察小分子化合物J2...
Objective:To obtain corneal epithelial cell(omitted)thelial cells of SD rats by primary culture.To determine cytotoxic effects of s(omitted)ule compounds J2 on the corneal epithelial cells and endothelial cells by MTT. To determine the effect of small molecule compounds (omitted) of corneal epithelial cells and endothelial cells by FCM and membrane ultrastructure of them(omitted)orneal allograft models were established to determine the effection of J2 on transplant rejection, to observe(omitted)es on c...
目录:
英文缩略词表第6-7页
中文摘要第7-11页
Abstract第11-14页
前言第15-19页
第一部分 SD大鼠角膜上皮细胞及内皮细胞的原代培养及鉴定第19-30页
  引言第19页
  材料和方法第19-23页
    ·实验动物第19页
    ·主要仪器与器械第19-20页
    ·实验试剂第20-21页
    ·实验方法及步骤第21-23页
  结果第23-28页
    ·倒置显微镜观察SD大鼠角膜上皮细胞及内皮细胞的形态第23-26页
    ·HE染色结果第26页
    ·免疫组化染色结果第26-28页
  讨论第28-29页
  小结第29-30页
第二部分 小分子化合物J2对SD大鼠角膜上皮细胞和内皮细胞毒性作用的研究第30-44页
  引言第30页
  材料和方法第30-33页
    ·实验材料第30页
    ·主要仪器与器械第30-31页
    ·实验试剂第31页
    ·实验方法及步骤第31-32页
    ·实验数据的处理及MTT测试结果的计算第32-33页
  结果第33-42页
    ·角膜上皮/内皮细胞MTT测试结果分析第33-38页
    ·倒置显微镜及透射电子显微镜下角膜上皮/内皮细胞形态学观察结果第38-42页
  讨论第42-43页
  小结第43-44页
第三部分 小分子化合物J2对体外培养SD大鼠角膜上皮细胞 CD8O分子表达的影响第44-58页
  引言第44-45页
  材料和方法第45-48页
    ·实验材料第45-46页
    ·主要仪器与器械第46页
    ·实验试剂第46页
    ·实验方法及步骤第46-48页
    ·统计分析第48页
  结果第48-53页
    ·流式细胞仪检测角膜上皮细胞CD80分子表达结果第48-49页
    ·应用AFM观察角膜上皮细胞膜表面超微结构及测量参数的统计结果第49-53页
  讨论第53-58页
    ·流式细胞分析仪检测角膜上皮细胞膜表面CD80分子表达第53-54页
    ·原子力显微镜观察小分子化合物J2对角膜上皮细胞膜表面超微结构的影响第54-56页
    ·应用AFM观测三组角膜上皮细胞的相关参数存在显著性差异第56-58页
  小结第58页
第四部分 小分子化合物J2对体外培养SD大鼠角膜内皮细胞CD80分子表达的影响第58-66页
  引言第58页
  材料和方法第58页
  结果第58-62页
    ·流式细胞仪检测角膜内皮细胞CD80分子表达结果第58-59页
    ·应用AFM观察角膜内皮细胞膜表面超微结构及测量参数的统计结果第59-62页
  讨论第62-65页
    ·流式细胞分析仪检测角膜内皮细胞膜表面CD80分子表达第62-63页
    ·原子力显微镜观察小分子化合物J2对角膜内皮细胞膜表面超微结构的影响第63-65页
    ·应用AFM测得三组角膜内皮细胞的相关参数存在显著性差异第65页
  小结第65-66页
第五部分 小分子化合物J2在动物模型中抗角膜移植排斥效果研究第66-81页
  引言第66页
  材料和方法第66-69页
    ·实验动物及分组情况第66页
    ·实验药品的配制第66页
    ·主要手术仪器及手术器械第66-67页
    ·主要手术药品第67页
    ·手术术前准备及手术方法第67-68页
    ·角膜植片标本制备及观察第68页
    ·AFM样品的制备和观测第68-69页
    ·记录角膜植片存活时间,收集AFM观测数据及进行统计学分析方法第69页
  结果第69-78页
    ·PKP术后角膜植片裂隙灯下临床观察第69-71页
    ·PKP术后三组角膜植片存活时间记录及统计学分析结果第71-72页
    ·PKP术后三组角膜植片HE组织学观察第72-73页
    ·AFM观测三组角膜植片角膜内皮层超微结构的差异第73-77页
    ·三组角膜植片AFM观测指标的收集及统计学分析第77-78页
  讨论第78-79页
  小结第79-81页
结论第81-83页
参考文献第83-88页
文献综述 同种异体角膜移植术后角膜内皮细胞的特征表现第88-98页
  参考文献第94-98页
就读期间发表文章第98-99页
致谢第99页
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