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CNE细胞正常氧与低氧状态microRNA对靶基因的差异调节
中文名称: CNE细胞正常氧与低氧状态microRNA对靶基因的差异调节
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论文编号: 4107624收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: The Different Effects of MicroRNA on the Same Target Gene in Normal and Hypoxia Condition of CNE
学位类型: 硕士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 生物学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: microRNA CNE 3’UTR全长 pRL-TK microRNA整体调控
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文摘要: MicroRNA(miRNA)是长度为20~24个核苷酸的非编码小RNA,通过与靶基因mRNA 3’UTR结(略)A的转录后调节.目前对于miRNA通过RISC复合物与特异性的mRNA 3’UTR相结合,调控mRNA转录后翻译过程的机制了解的比较透彻.但是多局限在单一miRNA或单一miRNA家族对特定靶基因mRNA的特异性调控.本课题以pRL(略)告载体为基本研究方法,构建一系列含有目的基因(略)长的荧光报告载体检测内源性miRNA对目的基因的调控作用.以低氧诱导的人鼻咽癌细胞CNE为模型,研究了低氧与非低氧两种不同状态下CNE细胞mi(略)的变化.同时研究了由此产生的miRNA表达谱变化对处于不同状态细(略)的差异调节及其调节规律.发现在低氧状态下,miRNA表达谱的变化更倾向于使促血管生成因子VEGF、PTN等基因3’UTR受到来自miRNA的抑制率降低,进而促进肿瘤细胞的血管新生;同时这种miRNA表达谱的变化更倾向于使低氧状态下细胞周期调控蛋白CCDN1等基因3’UTR受到来自miRNA的抑制率增加,抑制肿瘤在低氧环境下的增殖以适应低氧情况下细胞能量代谢的改变.另外,通...
MicroRNAs (miRNA) are a set of short non-coding RNA(omitted)4 nucleotied length. They can bind to the 3' untranslated regions (3'UTR) of target gene and regulate the post-transcriptiona(omitted) of mRNA. The mechanism of miRNA regulating the post-transcritional progress by (omitted)inding to the target gene with the RNA-Induced(omitted) Complex has been fully studied. However, the studies of miRNA are confined in one target gen(omitted)A or one target gene-one miRNA family. Here we used the pRL-TK Lusi...
目录:
摘要第3-4页
Abstract第4页
第1章 引言第7-21页
  ·miRNA 的发现与其生物发生机制第7-9页
    ·miRNA 的发现第7页
    ·miRNA 的转录和加工过程第7-9页
  ·miRNA 的作用机制第9-12页
  ·miRNA 的分类与保守性第12-13页
    ·miRNA 的分类第12页
    ·miRNA 的保守性第12-13页
  ·miRNA 的生物信息学分析第13-14页
  ·目的基因3’UTR 的调控第14-20页
    ·AREs 位点第15-16页
    ·IREs 位点第16页
    ·miRNA 对m RNA 3’UTR 的调控第16-18页
    ·’UTR 选择性剪切第18-20页
  ·miRNA 深度测序(Deep Sequencing)第20-21页
第2章 研究方法与结果第21-50页
  ·实验材料第21-23页
    ·实验试剂及材料第21-23页
    ·实验器材第23页
  ·实验方法第23-34页
    ·细胞培养第23页
    ·DFOM 低氧诱导CNE 模型第23页
    ·RNA 的提取及逆转录聚合酶链式反应第23-25页
    ·Real Time PCR 绝对定量第25-26页
    ·蛋白定量第26-27页
    ·pRL-TK 载体的改造方法第27-29页
    ·重组质粒的构建第29-33页
    ·细胞转染第33页
    ·海参荧光报告载体分析第33-34页
  ·研究方向与意义第34页
  ·实验结果第34-47页
    ·pRL-TK mut 多酶切位点载体的构建第34-36页
    ·目的基因3’UTR 荧光载体的构建第36-37页
    ·CNEmiRNA 表达谱分析第37-38页
    ·内源性miRNA 调控基因3’UTR 荧光实验分析第38-41页
    ·’UTR 靶点规律及影响因素第41-47页
  ·结论第47-48页
  ·讨论第48-50页
参考文献第50-56页
致谢第56-57页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第57页
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