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sCT和OGP的融合表达及活性试验
中文名称: sCT和OGP的融合表达及活性试验
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论文编号: 3688354收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: 无英文名称
学位类型: 硕士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 生物学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 降钙素 骨生长肽 酵母表达 骨质疏松症 融合表达 融合蛋白表达 磷酸酶活性
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文简介:骨质疏松症是一种骨代谢疾病,它是老年人常见疾病之一.降钙素(Calcitonin,CT)和骨生长肽(Osteogenicgrowthpeptide,OGP)是两种治疗骨质疏松症的药物.降钙素是一个由32个氨基酸组成的多肽激素,它可抑制破骨细胞的活性,降低血钙,其中鲑鱼降钙素(salmoncalcitonin,sCT)副作用最小而活性最高.骨生长肽是一个由14个氨基酸组成的多肽激素,它可刺激成骨细胞增殖,提高碱性磷酸酶活性.天然来源的sCT和OGP有限,而化学合成的成本又较高.我们用基因工程的方法获得了sCT和OGP的融合蛋白,通过体外和体内试验的方法检测到其具有抑制破骨细胞活性和刺激成骨细胞增殖的功能,并期望通过这两个方面同时对骨质疏松症进行治疗.该实验首先根据天然sCT和OGP的序列,人工合成了6个DNA片断,进行退火和连接后,获得含有sCT+OGP融合基因的重组质粒pPIC9,质粒电击转化进入毕赤酵产GS115,通过培养、筛选、SDS-APGE鉴定,获得一株稳定表达的菌株.用初步纯化的融合蛋白进行氨基酸序列分析及一系列体外、体内活性实验,证实了我们获得的融合蛋白表达正确,并且具有促进成骨细胞和成纤维细胞增殖、提高碱性磷酸酶活性和降低血钙的作用,显示了其良好的临床应用前景.
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