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寿胎丸抗大鼠同种异体卵巢移植模型急性排斥反应的机理研究
中文名称: 寿胎丸抗大鼠同种异体卵巢移植模型急性排斥反应的机理研究
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论文编号: 3102287收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Research on the Mechanism of ShouTaiWan Preventing Acute Rejection of Ovarian Allotransplantation in Rats
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 中医妇科学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 同种异体移植 卵巢 寿胎丸 急性排斥反应 同种异体 卵巢移植 移植模型
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论文简介:目的: 本课题通过建立SD 和 Wistar 大鼠间同种异体卵巢移植模型,观察补肾复方“寿胎丸”对同种异体卵巢移植后急性排斥反应的作用。本实验旨在通过观察寿胎丸对大鼠同种异体卵巢移植模型组织形态学与超微结构的影响、内分泌激素的影响、T 淋巴细胞亚群的影响及细胞因子 IL-2、IFN-γ的影响,来探讨补肾中药复方“寿胎丸”抗卵巢移植急性排斥反应的机理。 方法: 238只Wistar 雌性大鼠随机分为7组,每组大鼠34只。⑴寿胎丸低剂量组;⑵寿胎丸中剂量组;⑶寿胎丸高剂量组;⑷CsA组;⑸CsA+寿胎丸中剂量组:⑹正常组;⑺模型组。⑹组为正常组,不予手术处理。移植术前一日以及移植术后第 5—14天,15—28天,29—35 天中雌激素分泌最高峰当日取血检测血清E<,2>、P、FSH。各组于移植术后 d7、d14、d21、d28、d35 分批处死Wistar大鼠各5、8、8、8、5 只。取血、双侧卵巢及脾脏:检测与移植排斥密切相关的血清 Th1 细胞因子:IL-2、IFN-γ;用流式细胞仪检测脾脏 T 淋巴细胞亚群CD3<'+>、CD4<'+>、CD8<'+>的比值;光镜下计算各个发育阶段卵泡、黄体的数量,观察间质的变化,以及组织坏死或纤维化程度;电镜下观察移植卵巢超微结构变化。观察记录各组动物的体重、活动、皮毛、进食及粪便情况,比较分析药物的副反应。 结果: 1.移植卵巢组织形态学及超微结构 移植术后,各卵巢移植组大鼠动情周期恢复率由高到低依次是:CsA+寿胎丸中剂量组、CsA组、寿胎丸高剂量组、寿胎丸中剂量组、寿胎丸低剂量组、模型组。寿胎丸低、中、高剂量组、CsA 组、CsA+寿胎丸中剂量组移植卵巢体积和重量均较正常组卵巢有增加;且均高于模型组,差异有显著性(P<0.01)。寿胎丸低、中剂量组移植卵巢重量低于寿胎丸高剂量组,差异有显著性 (P<0.05)。CsA+寿胎丸中剂量组大鼠移植卵巢的间质损害程度最轻。寿胎丸低、中、高剂量组、CsA组、CsA+寿胎丸中剂量组的卵巢黄体、原始卵泡、初级生长卵泡、成熟卵泡数目均高于模型组,差异有显著性(P<0.01)。寿胎丸中、高剂量组、CsA组、CsA+寿胎丸中剂量组的次级生长卵泡数目均高于模型组,差异有显著性(P<0.01)。寿胎丸低、中剂量组初级生长卵泡数目均低于寿胎丸高剂量组,差异有显著性(P<0.01)。寿胎丸低、中、高剂量组次级生长卵泡数目相比较,均有显著性差异,(P<0.01)。CsA+寿胎丸中剂量组的原始卵泡和初级生长卵泡数目显著高于CsA组 (P<0.01)。 移植术后21天,模型组卵巢超微结构呈现急性排斥反应的表现。寿胎丸低、中、高剂量组、CsA 组、CsA+寿胎丸中剂量组移植卵巢超微结构基本正常,新生毛细血管结构正常。移植术后35天,各组移植卵巢超微结构均呈现褪化现象,但CsA+寿胎丸中剂量组褪化程度较轻。 2.血清内分泌激素E<,2>、P、FSH 移植术前,各卵巢移植组血清E<,2>、P水平均低于正常组,差异有显著性(P<0.01)。在移植术后5—14 天血清 E<,2>、P水平有大幅度升高,与移植前水平相比较,有显著性差异(P<0.01)。 移植术后15—28天,寿胎丸低、中、高剂量组、CsA组、CsA+寿胎丸中剂量组血清 E<,2>、P水平继续升高,均高于模型组,差异有显著性 (P<0.01)。CsA+寿胎丸中剂量组血清E<,2>、P水平最高,与正常组相比,无显著性差异。寿胎丸低剂量组血清E<,2>、P水平低于寿胎丸高剂量组,差异有显著性 (P<0.01)。 移植术后29—35天,寿胎丸低、中、高剂量组、CsA组、CsA+寿胎丸中剂量组血清E<,2>、P水平均高于模型组,差异有显著性 (P<0.01)。CsA+寿胎丸中剂量组血清E<,2>、P水平高于模型组、寿胎丸低、中、高剂量组及CsA组。寿胎丸低剂量组与寿胎丸高剂量组血清P水平相比,有显著性差异(P<0.05)。 移植术前各卵巢移植组血清FSH水平均高于正常组,差异有显著性(P<0.01)。寿胎丸低、中、高剂量组、CsA.组、CsA+寿胎丸中剂量组移植术后FSH水平开始逐渐下降,移植术后5—14天、术后15—28天及术后29—35天血清FSH水平均低于移植前水平,差异有显著性。模型组大鼠移植术后各时间段的血清FSH水平比较,无显著性差异。 3.脾脏T淋巴细胞亚群CD3<'+>、CD4<'+>、CD8<'+>含量 移植术后7天,各卵巢移植组大鼠脾脏CD3<'+>、CD4<'+>、CD8<'+>含量比正常组明显升高,差异有显著性。移植术后14天,CsA+寿胎丸中剂量组CD3<'+>含量较术后7天降低明显,差异有显著性(P<0.05)。组间比较,寿胎丸中、高剂量组、CsA组、CsA+寿胎丸中剂量组CD3<'+>含量均低于模型组,差异有显著性。寿胎丸高剂量组、CsA组、CsA+寿胎丸中剂量组CD4<'+>含量较术后7天降低明显,差异有显著性。组间比较,寿胎丸低、中、高剂量组、CsA组、CsA+寿胎丸中剂量组CD4<'+>含量均低于模型组,差异有显著性。寿胎丸低、中、高剂量组大鼠脾脏CD8<'+>水平高于正常组,差异有显著性(P<0.05)。 移植术后21天,寿胎丸低、中、高剂量组、CsA组、CsA+寿胎丸中剂量组大鼠脾脏CD3<'+>、CD4<'+>含量继续下降,均低于模型组(P<0.01)。寿胎丸低、中剂量组大鼠脾脏CD3<'+>含量高于正常组,差异有显著性(P<0.01)。寿胎丸低、中剂量组CD4<'+>含量高于正常组、寿胎丸高剂量组、CsA组、CsA+寿胎丸中剂组,差异有显著性。 移植术后28天,寿胎丸低、中、高剂量组、CsA组、CsA+寿胎丸中剂量组大鼠脾脏CD3<'+>、CD4<'+>含量继续降低,均低于模型组(P<0.01)。寿胎丸低剂量组CD3<'+>、CD4<'+>含量高于寿胎丸高剂量组、CsA组、CsA+寿胎丸中剂量组及正常组,差异有显著性。CsA组、CsA+寿胎丸中剂量组CD8<'+>含量低于模型组,差异有显著性(P<0.05)。 移植术后35天,寿胎丸低、中、高剂量组、CsA组、CsA+寿胎丸中剂量组大鼠脾脏CD3<'+>含量、CD4<'+>含量仍较低,均低于模型组,差异有显著性(P<0.01)。寿胎丸低剂量组的大鼠脾脏CD3<'+>、CD4<'+>含量高于正常组,差异有显著性。各组CD8<'+>水平相比,无显著性差异。 4.血清细胞因子IL-2、IFN-γ 各卵巢移植组大鼠移植术后7天的血清IL-2水平较高,均高于正常组水平,差异有显著性。移植术后14天时各卵巢移植组血清IL-2水平有所下降,寿胎丸中、高剂量组、CsA+寿胎丸中剂量、CsA组血清IL-2水平均低于模型组,差异有显著性。移植术后21天,寿胎丸低、中、高剂量组、CsA组、CsA+寿胎丸中剂量组血清IL-2水平继续下降,均低于模型组水平,差异有显著性。移植术后28天,CsA+寿胎丸中剂量组大鼠血清IL-2 水平低于模型组,差异有显著性 (P<0.05)。移植术后35天,各组大鼠血清 IL-2 水平组间比较,无显著性差异。 移植术后7天,各卵巢移植组大鼠血清IFN-γ水平均较正常组升高,差异有显著性。移植术后14天,模型组血清IFN-γ水平较正常组升高,差异有显著性(P<0.01)。移植术后21天,CsA组、CsA+寿胎丸中剂量血清IFN-γ水平低于术后7天水平,差异有显著性(P<0.05)。组间比较,模型组血清IFN-γ水平较正常组升高,差异有显著性(P<0.05)。移植术后28天,寿胎丸低、中、高剂量组、CsA组、CsA+寿胎丸中剂量组血清IFN-γ水平低于术后7天水平,差异有显著性。组间比较,寿胎丸中、高剂量组、CsA+寿胎丸中剂量组、CsA组血清IFN-γ水平低于模型组,差异有显著性。移植术后35天,CsA+寿胎丸中剂量组血清 IFN-γ水平低于模型组,差异有显著性(P<0.05)。 结论: 1.寿胎丸有助于移植术后大鼠动情周期的恢复,与CsA联合应用,协同作用明显。寿胎丸促进移植卵巢的成活,使其重量和体积增加,寿胎丸高剂量组在促进移植卵巢重量增加方面优于寿胎丸低、中剂量组。寿胎丸可以减轻移植卵巢急性排斥反应引起的间质损害程度,与CsA联合应用,有协同作用。寿胎丸有促进移植卵巢黄体及各阶段卵泡发育的作用,尤其是对原始卵泡及初级生长卵泡的发育有更明显的作用,并且存在一定的量效关系。寿胎丸与CsA联合应用,可以减轻移植卵巢超微结构的异常改变。 2.寿胎丸可促使移植卵巢恢复内分泌功能,减缓其内分泌功能的丢失,与CsA联合应用,有协同作用;寿胎丸低、中、高剂量间有一定的量效关系。寿胎丸可促使移植卵巢与垂体建立负反馈调节反应。 3.寿胎丸抑制了大鼠同种异体卵巢移植模型T淋巴细胞的增殖,尤其是抑制了辅助性T淋巴细胞的增殖,而且寿胎丸低剂量和中剂量的作用弱于寿胎丸高剂量,呈现一定的量效关系。 4.寿胎丸与CsA可抑制卵巢移植术后大鼠Th1型细胞因子的分泌,降调血清IL-2、IFN-γ水平,两者有协同作用。寿胎丸可能是通过以上各方面机理来起到抗大鼠同种异体卵巢移植模型急性排斥反应的作用。
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