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大鼠眼水平同向运动相关核团向动眼神经核投射的神经递质通路研究
中文名称: 大鼠眼水平同向运动相关核团向动眼神经核投射的神经递质通路研究
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论文编号: 3102153收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Study of Neurotransmitters Pathway from Conjugate-Horizontal-Eye-Movements-Related Nuclei to Oculomotor Nucleus in Rats
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 生理学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 大鼠 眼水平同向运动 动眼神经核 展神经核 前庭神经核 舌下前置核 脑桥旁正中网状结构 神经递质
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论文简介:目的: 探讨大鼠脑干内向动眼神经核内直肌亚核传入的运动前神经元的定位和分布,建立眼水平同向运动相关的脑干中枢核团与动眼神经核内直肌亚核之间的神经纤维通路。在此基础上,进一步检测这些通路中可能存在的兴奋性和抑制性的神经递质,从而建立眼水平同向运动相关核团向动眼神经核投射的抑制性和兴奋性神经递质通路,为眼水平同向运动障碍性疾病的发生和治疗提供解剖学依据。 材料和方法: 健康成年Wiser大鼠30只,220~250g,随机分成2组。第1组14只,大鼠麻醉后,置于脑立体定位仪上,将50%的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)溶液0.1 μ l缓慢注入到大鼠脑的一侧动眼神经核(oculomotor nucleus,OMN)内直肌亚核(medial rectus subdivision),存活48h后,灌注固定取脑,连续冠状冰冻切片(25~40 μ m)分5套收集,经TMB呈色反应,1套切片用于观察注射部位和脑干核团中HRP逆行标记细胞的分布。另外4套切片经TMB反应后分别进行抗谷氨酸(glutamate,Glu),γ-氨基丁酸(γ-amin0_butyric acid,GABA),谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)和谷氨酸受体1型(Glutamate Receptor1,GluRl)血清的SABC免疫组织化学染色,检测这些核团中存在的神经递质。第2组16只,大鼠麻醉后,置于脑立体定位仪上,将3%的荧光金(nuorogold,FG)0.1 μ l缓慢注入大鼠脑一侧动眼神经核内直肌亚核。动物存活5~7天,灌注固定取脑,连续冠状冰冻切片(25 μ m)分5组收集。1套用于观察注射部位和FG逆行标记细胞在脑干核团中的分布,另外4套分别进行抗GABA、Glu、GluRl、GAD血清的免疫荧光组织化学反应,观察这些脑内核团中逆行标记细胞、免疫荧光标记细胞和双标记细胞的分布及其向动眼神经核投射的神经递质联系。 结果: ⒈逆行标记结果:将HRP或FG注入一侧动眼神经核(OMN)内直肌亚核,在对侧展神经核(abducens nucleus,ABN)、双侧前庭神经内侧核(medial vestibular nucleus,MVN)、脑桥旁正中网状结构(pontine paramedian reticular formation,PPRF)及同侧前庭上核(superior vestibular nucleus,SVN)和舌下前置核(nucleus of prepositus hypoglosal,PH)均可见逆行标记细胞和纤维。 ⒉GABA、GAD、Glu、GluRl的免疫组织(荧光)化学反应的切片中分别可见逆行标记细胞,对应的一抗的免疫(荧光)阳性细胞,逆标/免疫(荧光)双标细胞三种标记细胞。在对侧展神经核和同侧舌下前置核主要存在Glu免疫/逆标和GluRl免疫/逆标的双标记细胞,GABA免疫/逆标、GAD免疫/逆标的双标记细胞较少;在同侧前庭神经内侧核主要可见Glu免疫/逆标和GluRl免疫/逆标的双标记细胞,未见明显的GABA免疫/逆标、GAD免疫/逆标的双标记细胞;而对侧前庭内侧核中则四种免疫双标记细胞都有;脑桥旁正中网状结构中GABA免疫/逆标、GAD免疫/逆标、Glu免疫/逆标、GluR1免疫/逆标的双标记细胞分布较为均匀。 结论: ⒈在对侧展神经核,双侧前庭神经内侧核、同侧前庭上核、舌下前置核以及脑桥旁正中网状结构中均有纤维投射到动眼神经核内直肌亚核,并可能参与协调双眼的水平同向运动。 ⒉展神经核核间神经元向对侧动眼神经核投射,其兴奋性投射主要以Glu为神经递质,部分通过GluRl型受体起作用;其抑制性投射中GABA可能不是起主要作用的神经递质。舌下前置核向同侧内直肌运动神经元投射,其兴奋性投射和抑制性投射与展神经核相似。 ⒊前庭神经核向同侧动眼神经核内直肌亚核的投射,主要是兴奋性的,用谷氨酸作为神经递质,部分通过GluRl受体起作用;而前庭神经内侧核向对侧内直肌亚核的投射包含兴奋性和抑制性的投射,分别用Glu和GABA作为相应的神经递质;脑桥旁正中网状结构向双侧动眼神经核内直肌亚核的投射同样存在兴奋性和抑制性的投射,其中Glu和GABA分别起一定的作用,是否存在递质共存,需进一步研究。
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