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通过调控NF-κB/IκB炎症信号转导通路治疗多器官功能障碍综合征的实验研究
中文名称: 通过调控NF-κB/IκB炎症信号转导通路治疗多器官功能障碍综合征的实验研究
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论文编号: 3101792收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: The Investigation of Therapy Multiple Organ Disfunction Syndrome by Regulated NF-κB/IκB Inflammation Signal Transduction Pass
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 外科学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 多器官功能障碍综合征 NF-κB AdIκB 基因治疗 细胞凋亡 Fas FasL
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文简介:目的:多器官功能障碍综合征(MODS)是全身感染、创伤、烧伤、重症胰腺炎、心肺复苏等疾病中存在的一个共同的难点问题。MODS中致炎因子的过度生成和中性粒细胞、单核/巨噬细胞凋亡障碍是导致疾病发生恶化的两个重要因子。而NF-κB的活化则是其中一个中心环节。在以往的研究中,许多学者试图通过阻断或封闭炎症因子来治疗MODS,但效果均不理想,甚至增加了死亡率。其主要原因可能为炎症因子及代谢产物数量众多,仅针对其中一种或几种进行干预往往达不到预期目的。NF-κB是一种重要的转录因子复合物,它通过激活细胞因子级联反应,生成促炎介质,抑制炎性细胞凋亡在MODS的病理生理过程中起重要作用。因此通过抑制上游转导通路NF-κB的活化,在较高水平上对产生炎症介质的总环节进行控制,是防治MODs新的曙光。本研究以腺病毒转载的IκB基因从中心静脉途径注入增加野生型IκB的表达,即通过直接增加细胞内NF-κB内源性抑制物水平以抑制其活化,从而有效阻断MODS发生发展的通路。 方法: 第一部分:成年SD大鼠28只,随机分为7个时相:注射病毒前,注射病毒后1d、3d、7d、14d、21d及28d。将重组腺病毒转载的AdLacZ基因经中心静脉途径导入SD大鼠体内,以X-gal染色法检测腺病毒介导的标识基因(LacZ)在大鼠体内的表达部位和时间。 第二部分:30只大鼠随机分为三组:A组(正常对照组);B组(MODS24小时组);C组(MODS7天组),A组大鼠缓慢注入生理盐水0.25ml/kg,B、C组大鼠缓慢注入油酸0.25ml/kg,4小时后B、C组经中心静脉途径注入脂多糖3/5mg/kg(体积1ml)。观察三组大鼠从致伤开始后的生理状态、刺激反应、活动度、死亡率、各脏器功能的生化指标及形态学改变等情况。 第三部分;50只大鼠随机分为五组:A组(正常对照组);B组(MODS损伤1天组);C组(MODS损伤7天组);D组(腺病毒转载IκB治疗1天组);E组(腺病毒转载IκB治疗7天组)。每组10只。A组大鼠缓慢注入生理盐水0.25ml/kg,B、C、D、E组大鼠缓慢注入油酸0.25ml/kg,4小时后颈部备皮消毒,经中心静脉途径A组缓慢注入生理盐水1ml,B、C、D、E组注入脂多糖3.5mg/kg(体积1ml)。同时D、E组注入滴度为1×10<'9>空斑形成单位(pfu)的腺病毒转载的IκB基因1ml。观察五组大鼠从致伤开始后1天、7天的生理状态、刺激反应、活动度、死亡率、各脏器功能的生化指标及形态学改变、血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)含量、肺、肝组织中NF-κBP65蛋白、Fas蛋白、FasL蛋白的表达。 结论: 1.经中心静脉途径注入腺病毒转载的IκB基因,可在肺、肝、肾、脾内高效表达,可用于相关系统疾病的基因治疗。 2.经中心静脉途径注入腺病毒转载的IκB基因在脑内始终无表达,不适于中枢神经系统疾病的治疗。 3.油酸/脂多糖序贯损伤可成功复制大鼠MODS模型。是研究以肺启动机制较好的MODS模型。 4.经中心静脉途径导入腺病毒转载的IκB基因,可降低MODS大鼠血肌酐、谷丙转氨酶、总胆红素、肌酸磷酸肌酶水平,改善动脉血氧分压。 5.经中心静脉途径注入腺病毒转载的IκB基因,可降低MODS大鼠血液中炎性因子TNF-α、IL-6的含量,抑制肝、肺组织NF-κB的活化(核转移),减轻NF-Kbp65蛋白表达。 6.经中心静脉途径导入腺病毒转载的IκB基因,可明显降低肝、肺组织的Fas和FasL表达,减轻MODS大鼠器官组织过度的细胞凋亡。 7.经中心静脉途径注入腺病毒转载的IκB基因治疗MODS的机制可能为直接增加野生型IκB的表达,抑制NF-KB活化,从而抑制炎症级联反应,抑制过度的细胞凋亡,治疗MODS。
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