免费论文
收费论文
发表论文
我要投稿
设为首页 招标网
联系我们
经济学|管理学|法学|计算机|医学|教育|文学|政治|艺术|哲学|更多 经济学|管理学|法律|计算机|医学|教育|文学|政治|艺术|哲学|更多
 论文搜索
  推荐服务: 论文发表 收费论文
期刊论文格式
毕业论文格式
期刊论文范文
毕业论文范文
论文致谢
毕业论文答辩
开题报告
论文选题
英文摘要书写
大鼠脂肪间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石/胶原/L-聚乳酸成骨的研究
中文名称: 大鼠脂肪间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石/胶原/L-聚乳酸成骨的研究
全文提供: 购买充值卡,就可下载本篇论文全文  
论文编号: 3101729收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Osteogenic Differentiation of Rat Adipose Derived Mesenchymal Stem Cells in Nanohydroxyapatite/collagen/L-poly Lactic Acid
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 外科学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 脂肪组织 细胞培养 干细胞 种子细胞 细胞分化 成骨细胞 纳米技术 羟基磷灰石 胶原 聚乳酸
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
全文提供: 购买充值卡,就可下载本篇论文全文  

       论文发表:快速、低价、包过!发表论文就找论文天下

论文简介:骨缺损是骨科经常遇到的难题。目前主要的治疗方法,如自体骨移植、异体骨移植、异种骨移植、金属及人工合成材料替代治疗等,均不能完全满足临床的需要。骨组织工程技术的发展为骨缺损的治疗提供了新的思路,其过程包括种子细胞的选择和培养、种子细胞与支架材料复合后联合培养及细胞一支架材料复合体植入体内三个步骤。本实验即基于上述原理,研究大鼠脂肪间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石/胶原/L-聚乳酸成骨的情况,探索组织工程化骨的理想构建方式。 第一章大鼠脂肪间充质干细胞分离、培养及生物学特性的研究 目的:研究大鼠脂肪间充质干细胞分离、培养的方法,并探讨其生物学特性,以期为组织工程提供理想的种子细胞。 方法:以无菌技术切取大鼠腹股沟脂肪组织,加入Ⅰ型胶原酶消化,多次离心获取细胞,接种入含10%新生牛血清的DMEM培养基,进行原代培养;待细胞生长至80%-90%融合,1∶2传代培养。倒置显微镜、Gimmsa染色、透射电镜观察细胞形态。细胞计数法测定第3代细胞的贴壁率。MTT法测定第3、5、10代细胞的生长曲线。流式细胞仪检测第5代细胞的表面抗原分子。 结果:原代细胞接种2d后,呈三角形、多角形、短梭形等多种形态,4-5d逐渐呈成纤维细胞样长梭形外观,7-9d细胞集落相互融合超过90%,呈漩涡状,10-12d长满瓶底。大鼠脂肪间充质干细胞增殖迅速,能稳定传代10代以上。Gimmsa染色,细胞胞核呈紫色,胞浆呈粉红色。透射电镜观察,细胞较幼稚,胞核较大,胞浆内细胞器不发达。第3代细胞贴壁率表明,2h、6h、12h细胞贴壁率分别为:33%±2%、75%±1%、92%±2%,24h细胞几乎完全贴壁。生长曲线显示,第3、5、10代细胞增殖迅速,各代间无明显差异。流式细胞仪检测显示,第5代细胞表达间充质干细胞的表面抗原分子:95%的细胞表达CD29、96%的细胞表达CD44,仅5%的细胞表达造血干细胞表面抗原分子CD34。 结论:自大鼠脂肪组织中分离出的细胞具有间充质干细胞的特征,可作为骨组织工程的种子细胞。 第二章大鼠脂肪间充质干细胞的体外成骨诱导、分化 目的:探讨大鼠脂肪间充质干细胞经体外诱导向成骨细胞分化的条件及能力,为进一步研究其体内成骨情况奠定基础。 方法:以含有10%新生牛血清、地塞米松、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠和维生素D<,3>的高糖DEME作为成骨诱导培养基,诱导第3代大鼠脂肪间充质干细胞向成骨细胞分化。倒置显微镜、Gimmsa染色、透射电镜观察成骨诱导后细胞形态变化。Gomori改良钙钴法行碱性磷酸酶染色;碱性磷酸酶检测试剂盒检测细胞内碱性磷酸酶含量。茜素红S、四环素荧光标记钙结节形成情况。RT-PCR检测骨钙素mRNA的表达。免疫组织化学染色、Western blotting检测Ⅰ型胶原蛋白的表达。 结果:大鼠脂肪间充质干细胞经成骨诱导后,细胞体积增大,呈短梭形、多角形;细胞呈集落样层叠生长。成骨诱导7d,Gimmsa染色,细胞胞核呈紫色,胞浆呈粉红色,胞浆颗粒增多;透射电镜观察,细胞体积明显增大,胞核增大,胞浆中细胞器发达,可见胞浆颗粒。成骨诱导7d,Gomori改良钙钴法碱性磷酸酶染色,胞浆内即可见浅棕色至棕黑色的颗粒;成骨诱导14d,大部分细胞染色呈阳性,阳性率为8096±2%。成骨诱导14d内,细胞内的碱性磷酸酶含量,随着培养时间的延长逐渐增高。成骨诱导21d,钙结节形成明显,茜素红S染色呈红色,四环素荧光标记呈金黄色。成骨诱导14d、21d,RT-PCR鉴定细胞骨钙素mRNA的表达,在280bp段有单一的目的条带。成骨诱导21d细胞的表达强度强于成骨诱导14d的细胞。成骨诱导7d,I型胶原蛋白免疫组织化学染色,细胞胞浆呈棕黄色;Westernblotting检测发现,成骨诱导14d的细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达强度强于成骨诱导7d的细胞。 结论:大鼠脂肪间充质干细胞经体外成骨诱导能向成骨细胞分化,具有成骨的能力。 第三章大鼠脂肪间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石/胶原/L-聚乳酸体内成骨的研究 目的:研究大鼠脂肪间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石/胶原/L-聚乳酸体内成骨的情况,以期建立大鼠脂肪间充质干细胞成骨的动物模型。 方法:将第3代大鼠脂肪间充质干细胞接种于纳米羟基磷灰石/胶原/L-聚乳酸构建体外细胞-支架材料复合体并进行成骨诱导,然后植入大鼠背部肌袋内4w、8w、12w,于不同时间点分别取材观察体内成骨情况。HE染色、扫描电镜观察大鼠脂肪间充质干细胞在纳米羟基磷灰石/胶原/L-聚乳酸上的粘附及类骨质形成的情况。5-溴脱氧尿嘧啶核苷免疫组织化学染色了解细胞标记情况。 结果:大鼠脂肪间充质干细胞能粘附在纳米羟基磷灰石/胶原/L-聚乳酸支架材料的表面及孔洞内。细胞-支架材料复合体植入体内4w、8w、12w,见大量类骨质形成,并逐渐取代支架材料,周围未见明显免疫反应。5-溴脱氧尿嘧啶核苷免疫组织化学染色证实类骨质来源于植入的大鼠脂肪间充质干细胞。 结论:纳米羟基磷灰石/胶原/L-聚乳酸是一种理想的支架材料,大鼠脂肪间充质干细胞具有体内成骨的能力。
本类相关论文:
·脂肪间充质干细胞体外诱导及复合PLGA体内异位
·构建带内支撑的组织工程化软骨的实验研究
·人脐带血间充质干细胞复合β-磷酸三钙的骨组织工
·复合富血小板血浆可注射型组织工程骨的构建与实验
·人脂肪来源干细胞构建组织工程化脂肪组织的体内外
·HGF基因转染骨髓间质干细胞联合Fn预涂支架体
·组织工程化雄激素分泌组织同种异基因移植的可行性
·海藻酸钠凝胶上构建血管化组织工程骨的基础研究
·转基因骨髓间充质干细胞与去细胞支架构建组织工程
·体外三维培养条件下人重组骨形态发生蛋白-2纳米
脂肪组织论文 细胞培养论文
·脂肪组织11β羟基类固醇脱氢酶1型mRNA表达
·脂联素受体2在子痫前期患者胎盘和腹部皮下脂肪组
·兔脂肪干细胞体外培养后改良诱导成软骨细胞的实验
·孤啡肽及其受体基因在小鼠脂肪组织中表达的研究
·成人脂肪间充质干细胞体外长期培养及成骨潜能的实
·隐孢子虫rP23间接ELISA诊断方法及体内瞬
·GDNF与NT-3双基因修饰的大鼠骨髓基质干细
·基因重组蛋白诱导多能干细胞基础研究
·骨髓间充质干细胞治疗急性放射性肠道损伤的实验研
·骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗急性放射性皮
干细胞论文 种子细胞论文
·以天然神经细胞外基质为支架构建组织工程神经修复
·内皮祖细胞在动脉瘤和Tubridge支架治疗后
·核素报告基因显像监测大鼠脑梗死模型中移植的转基
·骨髓源干细胞促进皮肤软组织扩张新生的研究
·未破裂颅内动脉瘤患者外周血内皮祖细胞数量的研究
·共培养诱导骨髓间充质干细胞向leydig细胞分
·不同诱导时间下大鼠脂肪间充质干细胞成骨的差异
·hTERT基因修饰的椎间盘髓核细胞永生化研究及
·兔脂肪干细胞的分离培养及诱导分化的实验研究
·人羊膜来源干细胞的性质及分化潜能研究
细胞分化论文 成骨细胞论文
·不同途径移植人骨髓间充质干细胞治疗大鼠脑缺血卒
·小鼠精原细胞与精母细胞miRNA差异表达及功能
·骨髓间充质干细胞联合定向诱导的神经元样细胞移植
·大鼠骨髓间充质干细胞向肝样细胞诱导分化及对急性
·东北红豆杉细胞培养过程中细胞分化与次生代谢间关
·计算机辅助设计、制作个性化骨缺损修复体的研究
·Nd(~3)+和Sm~(3+)对原代培养的成骨
·钛合金表面壳聚糖—酪蛋白磷酸肽生物复合薄膜的制
·钛基表面TiO_2纳米棒阵列的制备及不同纳米构
·白藜芦醇通过PI3K/Akt信号通路改善高糖对
  推荐期刊投稿
·上海财经大学学报
·山西医药杂志(下半月刊)
·东方药膳
·郧阳医学院学报
·河北果树
·广西林业
·广播电视大学学报(哲学社会科学版
·西江教育论丛
·中外法学
·神经解剖学杂志
 
·中华魂
·山东农机化
·重工与起重技术
·科学大观园
·实用肿瘤杂志
·教育科学论坛
·上饶师范学院学报
·现代保健
·Analysis in Theory a
·四川体育科学
 
·China Today
·祝您健康
·轻工标准与质量
·时代文学
·护理学报
·现代妇女.幸福生活
·新疆教育学院学报
·西北医学教育
·商界.评论
·成都中医药大学学报
   免费论文
公共管理 | 法学 | 理学 | 医药学
政治 | 社会学 | 文学 | 艺术 | 哲学
工学 | 计算机 | 文化 | 英语论文
经济学 | 财政 税收 | 证券金融
管理学 | 会计审计 | 工商管理 | 教育
财务管理 | 论文写作指导 | 应用文
   收费论文
马列毛邓 | 哲学宗教 | 社会科学
政治法律 | 军 事 | 经 济
文化科学教育体育 | 语言文字
文学 | 艺术 | 历史地理 | 自然科学
数理化 | 天文 | 生物科学 | 医药卫生
农业科学 | 工业技术 | 交通运输
航空航天 | 环境安全
   浏览历史

联系论文网 | 收费论文 | 发表论文 | 论文翻译 | 友情链接 | 全部分类 | 网站地图 | 期刊导航
版权所有 2008-2018 论文天下 www.lunwentianxia.com 京ICP备08104503号