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雷帕霉素阻断mTOR信号通路抑制病毒性心肌炎心肌纤维化的实验研究
中文名称: 雷帕霉素阻断mTOR信号通路抑制病毒性心肌炎心肌纤维化的实验研究
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论文编号: 3101697收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Empirical Study of Rapamycin Inhibiting Fibrosis of Viral Myocarditis by Blocking mTOR Signal Pathway
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 儿科学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 柯萨奇病毒 雷帕霉素 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 信号通路 心肌成纤维细胞 心肌细胞 病毒性心肌炎
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文简介:目的:哺乳类雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在细胞的生存、生长与增殖中起中心调控作用,本研究用柯萨奇病毒B3m株(CVB3m,CVB3)感染体外培养的SD大鼠心肌成纤维细胞和心肌细胞,建立病毒性心肌炎(VM)的细胞模型,用雷帕霉素(rapamycin)阻断mTOR信号通路,了解mTOR信号通路在VM心肌纤维化的可能作用机制。 方法:取新生SD鼠,用改良法原代培养心肌成纤维细胞和心肌细胞,根据细胞形态和免疫细胞化学染色对细胞进行鉴定,建立CVB3感染的细胞模型。用mTOR抑制剂——雷帕霉素对细胞模型进行干预,采用RT-PCR、Western Blot、免疫细胞化学染色等方法检测细胞mTOR、eIF-4E、Ⅰ型胶原及Smad3表达,应用SPSS11.5统计软件对数据进行统计学分析,P<0.05为差别有显著性统计学意义。 结论: ⒈低浓度的胰蛋白酶和胶原酶合用,结合2次差速贴壁分离培养大鼠心肌细胞,可提高心肌细胞的存活率和纯度,使细胞搏动良好。 ⒉心肌成纤维细胞可作为CVB3的感染细胞建立VM细胞模型。 ⒊雷帕霉素使心肌成纤维细胞内源性mTOR表达下调,在一定剂量内,呈剂量和时间依赖性,mTOR可作为雷帕霉素作用的靶点。 ⒋雷帕霉素抑制CVB3诱导的心肌细胞成纤维细胞增殖是通过mTOR/eIF-4E信号通路起作用的。 ⒌雷帕霉素抑制CVB3可诱导心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原及Smad3表达,提示mTOR/eIF-4E信号通路与Smad信号通路共同作用,参与CVB3诱导的心肌纤维化过程。 ⒍CVB3可诱导心肌细胞I型胶原表达,雷帕霉素抑制CVB3诱导的心肌细胞mTOR、eIF-4E、Ⅰ型胶原及Smad3表达,提示心肌细胞在CVB3感染时细胞表型可能发生改变,并通过mTOR/eIF-4E及Smad信号通路在纤维化过程中起一定作用。
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