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去细胞牛颈静脉经RGD修饰促进内皮生长的实验研究
中文名称: 去细胞牛颈静脉经RGD修饰促进内皮生长的实验研究
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论文编号: 3101683收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Improves Endothelialization of Acellular Bovine Jugular Vein Conduit Modified by RGD: A Experimental Study
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 外科学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 牛颈静脉 低温等离子体 表面修饰 RGD肽 血管移植 内皮化 新生内膜
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文简介:第一章采用等离子技术RGD修饰去细胞牛颈静脉管道的试验研究。 目的:探讨用等离子接枝RGD修饰去细胞牛颈静脉提高细胞粘附的可行性。 方法:采用去细胞光化学交联方法制备牛颈静脉血管(Bovine Jugular Vein,BJV),冷冻干燥处理,分别通过氨低温等离子体接枝聚合法和物理吸附法,在其表面引入细胞粘附肽GRDSPK(甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸-脯氨酸-赖氨酸)。物理吸附法:牛颈静脉血管材料直接浸入GRGDSPK肽溶液;氨低温等离子体接枝聚合法:氨低温等离子体在放电功率50w、预处理2min后浸入GRDSPK肽(0.22mg/ml)溶液。XPS电子能谱、激光共聚焦显微镜检测修饰前后牛颈静脉血管材料表面的理化性质;细胞种植实验检测修饰前后牛颈静脉血管材料表面的生物相容性;拉力实验对修饰前后力学性能进行评价。 结果:经氨低温等离子预处理后,在牛颈静脉表面引入大量的极性-C-O-基团及含氮基团,进一步与GRGDSPK肽(0.22mg/ml)溶液作用后,牛颈静脉表面的极性基团明显下降;与物理吸附法相比,经氨低温等离子预处理结合的GRGDSPK肽抵抗了体外流体剪切力的作用;体外细胞种植试验也支持经氨低温等离子预处理结合GRGDSPK肽的方法改善牛颈静脉血管材料细胞亲和性的效果更为显著;去细胞牛颈静脉的断裂延伸率由于冷冻干燥处理有一定程度下降。 结论:通过氨低温等离子处理可以实现促细胞粘附分子GRGDSPK肽与去细胞牛颈静脉的牢固结合,并由此提高了去细胞牛颈静脉的细胞亲和性;但前期的冷冻干燥处理对其力学性能有一定程度的影响。 第二章RGD修饰促进去细胞牛颈静脉体内移植早期内皮化的研究。 目的:探讨采用等离子技术RGD修饰的去细胞牛颈静脉植入大鼠体内后,能否具有促进早期血管内皮化的作用。 方法:氨等离子处理GRGDSPK肽修饰的去细胞牛颈静脉血管材料(PR-BJV)与未经修饰的去细胞牛颈静脉血管材料(BJV),根据管腔匹配原则缝制成直径3.1mm小管道。选择健康SD大鼠,体重350—380g作为试验动物;按配对原则进行大鼠下腔静脉置换,PR-BJV组(n=24)、BJV组(n=24)。移植后3d、1w、2w、3w取出移植血管,观察血管的通畅性和表面血栓形成情况,测量并比较新生内膜厚度,光镜和扫描电镜观察血管内壁内皮细胞生长情况,免疫组化方法对新生内膜进行分析。 结果:PR-BJV组在移植后3d即有含大量细胞的内膜薄层在去细胞牛颈静脉血管表面形成,随时间延长新生内膜并未显著厚度,并且表面较少血栓形成;BJV组血管表面3d内少量血栓形成,从7d开始,随时间延长去细胞牛颈静脉血管表面血栓逐渐增多、内膜明显增厚。从7d开始,随时间延长PR—BJV组管腔通畅率高于BJV组;扫描电镜及免疫组化证实PR-BJV组7d血管表面粘附大量新生内皮细胞,14d即在血管表面形成完整的内皮细胞层,血栓及内膜增生由此减轻;在7d-14d,BJV组由于血栓和内膜过度增生,通畅率降低,21d在血管表面也未见形成完整的内皮细胞单层,仅见吻合区少量内皮细胞向血管迁移。 结论:等离子处理RGD修饰技术促进去细胞交联牛颈静脉的生物相容性,进而提高了去细胞交联牛颈静脉在大鼠体内内皮化的进程。
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