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DADS靶向诱导人胃癌细胞分化与周期阻滞及机理研究
中文名称: DADS靶向诱导人胃癌细胞分化与周期阻滞及机理研究
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论文编号: 3101450收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Effect and Mechanism of Target for Induction of Differentiation and Cycle Arrest in Human Gastric Cancer Cells by Diallyl Disulfide
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 病理学与病理生理学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 胃肿瘤 二烯丙基二硫 增殖抑制 ERK 细胞周期 检查点 Chk1/2激酶
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文摘要: 胃癌是我国最常见的恶性肿瘤,其发病率和死亡率仍居首位,每年约有40余万人患胃癌,而死于胃癌者多达30余万,大大高(略)家.目前,传统的手术治疗、放射治疗、化疗治疗等疗效较差、易复发、副反应严重,5年生存率仅为30%左右.因此,提高5年生存率,探索治疗胃癌的新方法,寻找新一代更有效、低毒和价廉的抗肿瘤药物,一直是亟待解决的课题.现在,逆转人胃癌细(略)为生命科学研究前沿领域.二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)是大蒜中的一种脂溶性的有效成分,对乳腺癌、肝癌、肺癌、膀胱癌、结肠癌、前列(略)等多种肿瘤均有明显的抑制作用,是一种很有开发潜力的抗肿瘤候选药物. 【DADS诱导人胃癌细胞增殖抑制、分化与周期阻滞的(略) 本研究采用MTT法、电镜观察、Con A凝集实验、碱性磷酸酶(ALP)比活性测定、骨架蛋白细胞化学、划痕标记荧光染(略)SLDT)、免疫组化等方法,观察DADS对体外培养的人胃癌MGC803细胞的生长抑制与诱导分化效应.MTT比色实验结果显示,DADS浓度从20、25、30到35mg·L~(-1)处理人胃癌MGC803细胞,其吸...
Gastric cancer is (omitted)ommon type of malignancy in China, and its morbidity and mortality rank first now. There are 400,000 people or (omitted)stric cancer, and 300,000 people succumb to i(omitted)s much higher than that in the west developed countries. At present, therapeutic effect of orthodox(omitted)therapy, radiation therapy and chemotherapy is comparatively weak, easy to palindromia, furthermore , their side effe(omitted)ous and the 5-year survival rate of gastric cancer remains only ab...
目录:
中文摘要第8-14页
英文摘要第14-21页
英文缩写注解第22-23页
引言第23-28页
第一部分 DADS 诱导人胃癌细胞增殖抑制、周期阻滞与分化第28-54页
  ·材料与方法第28-34页
    ·细胞第28页
    ·主要试剂(盒)第28-29页
    ·主要仪器和设备第29页
    ·方法第29-34页
      ·体外细胞培养第29页
      ·药物处理第29-30页
      ·MTT 比色实验第30页
      ·透射电子显微镜观察第30页
      ·Con A 凝集性实验第30-31页
      ·碱性磷酸酶(ALP)比活性测定第31-32页
      ·细胞骨架蛋白的细胞化学染色第32页
      ·细胞间缝隙连接通讯功能检查-划痕标记荧光染料示踪技术第32-33页
      ·流式细胞仪检测第33页
      ·免疫组化第33页
      ·Western Blot第33页
      ·统计学处理第33-34页
  ·结果第34-48页
    ·MTT 实验结果第34-35页
    ·电镜观察第35-36页
    ·Con A 的凝集率第36-37页
    ·碱性磷酸酶(ALP)比活性测定第37-38页
    ·细胞骨架结构观察第38-39页
    ·细胞间缝隙连接通讯功能检查-划痕标记荧光染料示踪技术第39-40页
    ·流式细胞仪检测第40-43页
    ·免疫组织化学第43-45页
    ·DADS 诱导 MGC03 细胞磷酸化与总 ERK 表达第45-48页
  ·讨论第48-53页
  ·小结第53-54页
第二部分 DADS 对人胃癌 MGC803 和 BGC823 细胞 G_2/M 期检查点激酶通路的影响第54-76页
  ·材料和方法第54-59页
    ·细胞第54页
    ·主要试剂(盒)第54-55页
    ·主要仪器和设备第55-56页
    ·方法第56-59页
      ·体外细胞培养第56页
      ·药物处理第56页
      ·RT-PCR第56-58页
      ·Western blot第58页
      ·免疫共沉淀第58页
      ·统计分析第58-59页
  ·结果第59-71页
    ·RT-PCR 检测Chk1 和Chk2 在mRNA 水平的改变第59-61页
      ·人胃癌MGC803 和BGC823 细胞Total RNA 鉴定第59页
      ·RT-PCR 检测表达基因第59-61页
    ·Western blot第61-69页
      ·DADS 诱导 MGC803 和 BGC823 细胞 Chk1 和磷酸化 Chk1 表达第61-63页
      ·DADS 诱导 MGC803 和 BGC823 细胞 Chk2 和磷酸化Chk2 表达第63-65页
      ·DADS 诱导BGC823 细胞Chk 下游分子Cdc25C、cyclin 81 的表达第65-67页
      ·DADS 诱导 MGC803 和 BGC823 细胞 ATR 和磷酸化 ATR 表达第67-69页
    ·免疫共沉淀检测 Chk1、Chk2 与 Cdc25C 结合第69-71页
  ·讨论第71-75页
  ·小结第75-76页
第三部分 Chk1 和 Chk2 基因沉默对 DADS G_2/M 期阻滞作用及检查点激酶通路的影响第76-98页
  ·材料和方法第76-83页
    ·细胞第76页
    ·主要试剂(盒)第76-77页
    ·主要仪器和设备第77页
    ·实验图像和数据分析用软件第77-78页
    ·方法第78-83页
      ·体外细胞培养第78页
      ·RNAi 干扰及转染实验第78页
      ·实时荧光定量 PCR第78-82页
      ·Western Blot第82页
      ·MTT 比色实验第82页
      ·流式细胞仪检测第82页
      ·统计分析第82-83页
  ·结果第83-96页
    ·实时荧光定量PCR 检测RNAi 后Chk1 和Chk2 mRNA 表达的改变第83-87页
    ·Chk1 和Chk2 RNAi 后Chk1 和Chk2 蛋白表达的改变第87-89页
    ·Chk1 、Chk2 基因沉默后MTT 比色实验结果第89-92页
    ·干扰后细胞周期的改变第92-94页
    ·Chk1 和Chk2 RNAi 后下游蛋白表达的改变第94-96页
  ·讨论第96-97页
  ·小结第97-98页
结论第98-99页
参考文献第99-112页
综述一第112-128页
综述二第128-140页
攻读博士期间的主要科研成果第140-141页
致谢第141页
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