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Ri质粒对茶树和苦瓜的遗传转化及相关功能成分研究
中文名称: Ri质粒对茶树和苦瓜的遗传转化及相关功能成分研究
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论文编号: 3101429收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Studies on Genetic Transformation of Tea Plant(Camellia Sinensis L.) and Bitter Gourd(Momordica Charantia) Induced by Ri Plasmid and Their Correlative Functional Components
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 茶学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 茶树 苦瓜 Ri质粒 儿茶素 苦瓜皂甙 发根农杆菌 功能成分
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论文摘要: 发根农杆菌(Agrobactorium rhizogenes,Ar)中Ri质粒(根诱导质粒,r(略)ducing plasmid)的T-DNA转移并整合到植物基因组诱导产生发根(hairy root).相对于常规细胞培养,发根培养系统具有生长快速,不需外源植物激素、遗传性状稳(略)生代谢物质能力强等特点,是生产次生代谢产物较理想的细胞培养体系. 国内外医药学方面的大量研究证明:茶叶中的儿茶素(特别是酯型儿茶素)和苦瓜中的苦瓜皂甙等次生代谢产物具有明显的保健及药理功能.近年来,利用发根培养体系生物合成植物有效成分已成为植物医药研究热点.由(略)生富含多酚的木本植物,Ri质粒介导的遗传转化有相当的难度,诱导发根形成的成功率低.因此,目前国内(略)完整稳定的Ri质粒转化茶树及其发根培养生产次生代谢物的技术体系;而利用Ri质粒转化苦瓜产生发根以及利用苦瓜发根培养系统生物合成苦瓜皂甙等功能成分的研究在国内外仍是空白. 本文对发根农杆菌致根活力鉴定(略)对发根农杆菌的抑制作用及抗酚菌株的筛选、苦瓜皂甙快速测定方法和Ri质粒高频诱导茶及苦瓜发根形成的影响因素进行了系统...
A part of the(omitted)t-inducing Ri plasmid of Agrobacterium rhizogenes k(omitted)DNAtransfers the infected plant cell and becomes intergrated with its genomic DNA, and bringshairy root. A(omitted) with normal cell culture, the hairy root culture system is characterizedby high growth rate, free-hormone, genetic stability and p(omitted)of the higher l(omitted)condary metabolites, which is a perfect cell culture system for production of secondarymetabolites. Medical and pharmological studies po...
目录:
中文摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
缩略词表第10-18页
上篇第18-96页
  第1章 绪论第19-55页
    ·Ri质粒对植物遗传转化的研究进展第19-27页
      ·发根农杆菌及其Ri质粒的特性第19-23页
        ·发根农杆菌的特性第19-20页
        ·Ri质粒的分类第20页
        ·Ri质粒的结构与功能第20-22页
        ·rol基因的位点与特征第22-23页
        ·发根农杆菌的侵染和致病过程第23页
      ·发根及其转化和鉴定第23-24页
        ·发根的特点第23页
        ·发根的转化与鉴定第23-24页
      ·影响发根农杆菌对植物遗传转化效率的因素第24-26页
        ·不同菌株属性农杆菌对转化的影响第24页
        ·植物基因型及外植体对转化的影响第24-25页
        ·化学因子对转化的影响第25页
        ·物理因子对转化的影响第25-26页
      ·Ri质粒对植物遗传转化在植物次生代谢产物生产中的应用现状第26-27页
    ·国内外茶叶相关研究进展第27-43页
      ·茶叶儿茶素保健功能研究第27-39页
        ·抗癌、抗氧、抗衰作用第28-31页
          ·抗癌作用第28-29页
          ·抗氧化作用第29-30页
          ·抗衰老作用第30-31页
        ·降脂、降糖、降压及减肥作用第31-33页
          ·降脂作用第31页
          ·降糖作用第31-32页
          ·降压作用第32页
          ·减肥作用第32-33页
        ·抑菌、消炎和除臭作用第33-37页
          ·抑菌作用第33-34页
          ·消炎作用第34-36页
          ·除臭作用第36-37页
        ·对神经损伤性疾病的防治作第37-39页
          ·预防阿耳茨海默(氏)病的作用第37-38页
          ·预防帕金森(氏)痴呆症的作用第38-39页
      ·茶树离体培养儿茶素生物合成研究第39-41页
        ·茶树离体培养对儿茶素组成的影响第39页
        ·茶树离体培养中培养基组成对儿茶素生物合成的影响第39-40页
        ·茶树离体培养中茶树品种对儿茶素生物合成的影响第40页
        ·茶树离体培养中前体物对儿茶素生物合成的影响第40页
        ·茶树离体培养中培养方法对儿茶素生物合成的影响第40-41页
      ·农杆菌对茶树遗传转化研究第41-43页
    ·本研究的目的与意义第43-45页
    ·本研究的主要内容第45-46页
    参考文献第46-55页
  第2章 发根农杆菌菌株特性及其活力鉴定研究第55-68页
    ·引言第55页
    ·材料与方法第55-59页
      ·实验材料第55-57页
        ·供试菌株第55-56页
        ·培养基第56页
        ·试剂第56-57页
      ·实验方法第57-59页
        ·Km抗性筛选和菌液生长曲线及菌落特征第57页
        ·生化检测(3-酮乳糖产物法)第57页
        ·PCR鉴定第57-59页
        ·绘图第59页
    ·结果与分析第59-64页
      ·Km抗性培养的菌液生长曲线及菌落特征第59-61页
      ·发根农杆菌菌株活力的生化测定第61页
      ·发根农杆菌菌株活力的生物测定第61-62页
      ·发根农杆菌菌株的PCR鉴定第62页
      ·不同抗菌素对发根农杆菌的抑制效果第62-64页
    ·讨论第64-66页
    ·本章小结第66-67页
    参考文献第67-68页
  第3章 茶多酚对发根农杆菌的抑制作用及抗酚菌株的筛选第68-78页
    ·引言第68页
    ·材料与方法第68-70页
      ·实验材料第68-69页
        ·菌株第68页
        ·AB培养基第68页
        ·儿茶素第68-69页
        ·外植体及试管苗原料第69页
      ·实验方法第69-70页
        ·试管苗培养第69页
        ·菌种的活化第69页
        ·儿茶素对发根农杆菌抑制的液体培养实验第69页
        ·儿茶素对发根农杆菌抑制的固体培养实验第69页
        ·外植体的转化第69-70页
        ·绘图及统计第70页
    ·结果与分析第70-74页
      ·儿茶素对发根农杆菌的抑制作用第70-71页
      ·发根农杆菌抗茶多酚菌株的筛选及其抗酚性实验第71页
      ·抗酚菌株与非抗酚菌株对茶树遗传转化效果比较第71-74页
    ·讨论第74-75页
    ·本章小结第75页
    参考文献第75-78页
  第4章 Ri质粒对茶树的遗传转化及儿茶素等功能成分的变化研究第78-96页
    ·引言第78页
    ·材料与方法第78-81页
      ·实验材料第78-79页
        ·植物材料第78-79页
        ·供试发根农杆菌菌株第79页
        ·培养基第79页
      ·实验方法第79-81页
        ·试管苗培养第79页
        ·菌种的保存和活化第79-80页
        ·外植体的转化第80页
        ·外植体的特殊处理第80页
        ·乙酰丁香酮处理第80页
        ·Ri质粒对茶树遗传转化效果的多因素正交实验设计第80-81页
        ·统计分析和作图第81页
        ·组织鲜样中儿茶素和咖啡碱提取及样品制备第81页
        ·儿茶素和咖啡碱含量的HPLC分析方法及条件第81页
    ·结果与分析第81-91页
      ·Ri质粒对茶树遗传转化效果的多因素正交实验第81-83页
      ·发根农杆菌菌株及外植体种类对茶树发根诱导效率的影响第83-86页
        ·发根农杆菌菌株种类对茶树发根诱导效率的影响第83-85页
        ·外植体种类对茶树发根诱导效率的影响第85-86页
      ·浸染因素对茶树发根诱导效率的影响第86-87页
        ·菌液浓度对茶树发根诱导的影响第86-87页
        ·浸染时间对茶树发根诱导的影响第87页
      ·共培养因素对茶树发根诱导的影响第87-90页
        ·共培养时间对茶树发根诱导的影响第87-88页
        ·乙酰丁香酮(AS)对茶树发根诱导的影响第88-89页
        ·植物生长调节剂对茶树发根诱导的影响第89-90页
      ·茶树发根中儿茶素及咖啡因含量的变化第90-91页
    ·讨论第91-93页
    ·本章小结第93-94页
    参考文献第94-96页
下篇第96-138页
  第1章 绪论第96-111页
    ·苦瓜的有效成分研究第96-99页
      ·三萜类皂甙第96-98页
      ·甾体类皂甙第98页
      ·蛋白质、多肽及氨基酸类第98-99页
      ·其他化合物第99页
    ·苦瓜的药理功能研究第99-103页
      ·降血糖作用第99-101页
      ·抗衰老作用第101-102页
      ·抗肿瘤作用第102页
      ·抗病毒和抗艾滋病作用第102-103页
      ·其它作用第103页
    ·苦瓜皂甙分离纯化技术研究第103-105页
      ·醇提工艺的优化研究第103-104页
      ·超声波辅助技术应用第104页
      ·微波辅助技术应用第104-105页
      ·酶提辅助技术应用第105页
    ·苦瓜皂甙的分析测定方法研究第105页
      ·高效液相色谱法第105页
      ·高效薄层色谱法第105页
      ·分光光度法第105页
    ·本研究的目的与意义第105-107页
    ·本研究的主要内容第107-108页
    参考文献第108-111页
  第2章 超声乙醇浸提快速测定苦瓜总皂甙的方法研究第111-120页
    ·引言第111页
    ·材料与方法第111-112页
      ·实验材料第111页
      ·实验方法第111-112页
        ·苦瓜总皂甙的浸提第111-112页
        ·测定波长的确定第112页
        ·建立直线回归方程第112页
        ·统计分析和作图第112页
    ·结果与分析第112-116页
      ·测定波长的确定第112页
      ·建立直线回归方程第112页
      ·显色稳定性考察结果第112-114页
      ·样品量对超声醇提效果的影响第114-115页
      ·超声醇提与常规热醇提效果比较第115页
      ·超声醇提─香草醛显色法重复性实验结果第115-116页
      ·超声醇提加标回收率实验结果第116页
    ·讨论第116-117页
    ·本章小结第117-118页
    参考文献第118-120页
  第3章 Ri质粒对苦瓜遗传转化及苦瓜皂甙含量变化研究第120-138页
    ·引言第120页
    ·材料与方法第120-122页
      ·实验材料第120-121页
        ·植物材料第120页
        ·供试发根农杆菌菌株第120页
        ·培养基第120-121页
        ·化学试剂第121页
      ·实验方法第121-122页
        ·试管苗培养第121页
        ·菌种的保存和活化第121页
        ·外植体的转化第121-122页
        ·苦瓜总皂甙测定第122页
    ·结果与分析第122-132页
      ·Ri质粒对苦瓜遗传转化效果的多因素正交实验第122-123页
      ·菌株特性对苦瓜遗传转化效果的影响第123-125页
        ·不同菌株对苦瓜遗传转化效果的影响第123-124页
        ·发根农杆菌的生理状态及菌液浓度对苦瓜遗传转化效果的影响第124-125页
      ·苦瓜外植体特征对苦瓜遗传转化效果的影响第125-127页
        ·不同苦瓜品种对苦瓜遗传转化效果的影响第125-126页
        ·不同苦瓜器官对苦瓜遗传转化效果的影响第126页
        ·不同苦瓜苗龄对苦瓜遗传转化效果的影响第126-127页
      ·浸染因素对苦瓜遗传转化效果的影响第127-128页
        ·浸染时间对苦瓜遗传转化效果的影响第127-128页
        ·菌种悬浮液种类对苦瓜遗传转化效果的影响第128页
      ·共培养因素对苦瓜遗传转化效果的影响第128-131页
        ·共培养时间对苦瓜遗传转化效果的影响第129页
        ·乙酰丁香酮(AS)对苦瓜遗传转化效果的影响第129-130页
        ·植物生长调节剂对苦瓜遗传转化效果的影响第130-131页
      ·苦瓜发根形态特征及生长速度第131页
      ·苦瓜发根中苦瓜皂甙含量第131-132页
    ·讨论第132-134页
    ·本章小结第134-135页
    参考文献第135-138页
全文总结第138-141页
  ·主要研究结果第138-139页
  ·主要创新之处第139-140页
  ·展望第140-141页
致谢第141-143页
作者简介第143-144页
在读期间科研学术成果第144-145页
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