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芪蓝糖脂宁胶囊复方再优化研究及其糖脂双调的机理探讨
中文名称: 芪蓝糖脂宁胶囊复方再优化研究及其糖脂双调的机理探讨
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论文编号: 3101265收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: 无英文名称
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 临床中药学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 复方再优化 直接实验设计法 糖尿病 高脂血症 胰岛素抵抗 组方配伍 芪蓝糖脂宁胶囊
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论文简介:糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)是一种常见的内分泌代谢性疾病,其基本病理特点为胰岛素分泌绝对或相对不足,或外周组织对胰岛素不敏感,引起以糖代谢紊乱为主,包括脂肪、蛋白质代谢紊乱的一种全身性疾病。因此,单纯控制血糖不能完全消除糖尿病患者冠心病等大血管并发症,往往同时进行调脂治疗。中医传统复方注重整体调节,标本兼治,近年来,在治疗糖尿病合并高脂血症方面表现了巨大的潜力。 芪蓝糖脂宁胶囊是导师高学敏教授针对糖尿病合并高脂血症的病因病机,在中医基础理论指导下,结合现代药理学研究成果创制的科研处方。前期张德芹博士已对其进行了文献、理论和药效学实验研究,证明其有显著的糖脂双调的效果,是治疗糖尿病合并高脂血症的有效良方。但是,该方含有黄芪、绞股兰、红曲等九味中药,药味较复杂,为生产、质控和服用都带来了不便,因此,本课题以此方为研究对象,采用直接实验设计法,对其进行复方再优化研究,然后,对再优化所得最优方进行糖、脂双降的药效和机理探讨。 1.文献研究 1.1 糖尿病合并高脂血症与胰岛素抵抗全面查阅了近年来国内外糖尿病合并高脂血症、胰岛素抵抗及理论的相关研究文献资料,阐明了胰岛素抵抗为糖、脂代谢紊乱的共同病因,并对糖尿病合并高脂血症胰岛素抵抗的发病机理及研究方法进行了系统的总结和综述。 1.2 中药复方再优化研究进展查阅整理了目前应用于复方再优化的主要实验设计方法及数据优化处理方法,掌握了相关项目科研的研究动念。 2.实验研究 2.1 芪蓝糖脂宁复方再优化试验运用直接实验设计法安排药效实验,获得实验信息,在前期复方再优化理论研究的基础上,结合专业知识,将药味间的交互作用引入变量筛选过程,利用SAS软件进行多元线性回归分析,得到针对不同效应指标的回归方程,并预测出各指标相应的优化方。依据传统中医药理论及各优化方中药味和药量出现的频次,拟合出最优方——芪曲糖脂宁胶囊(QQTZN)。 筛选所得最优方QQTZN由黄芪、葛根等五味中药组成,药味精良,且符合医理药理,功能益气健脾,生津止渴,化瘀降浊。 2.2最优方药效实验验证 采用高糖高脂饲料合并小剂量链脲佐菌素注射的方法复制2型糖尿病合并高脂血症模型。在此基础上观察最优方对模型大鼠糖、脂代谢以及胰腺和肝脏病理形态学改变。 综上所述,最优方药少力专,糖脂双调的药效学作用确切,明显优于反证方,与理论预测结果一致,进一步证实了复方再优化方法对确有疗效的中药复方的筛选和精练处方的作用。结合现代医学知识和中医传统理论,分析反证方的组方特点,可以看出数据筛选剔除了部分滋阴及降脂作用相对较强而补气和降糖作用相对较弱的中药,从而达到精练处方的目的,使最优方更突出了补气健脾,化瘀降浊,进而糖脂双调的特点。 2.3机理探讨 2.3.1对胰岛素受体前水平影响 采用放射免疫技术研究了最优方对模型大鼠血清胰岛素含量的影响,结果表明,QQTZN高剂量组与模型组相比,血清胰岛素水平明显降低,胰岛素敏感性指数明显升高。中、低剂量组与模型组相比,血清胰岛素水平无明显变化,但胰岛素敏感性指数明显升高。 采用免疫组化技术研究了最优方对模型大鼠胰岛α、β细胞胰岛素、胰高糖素表达的影响。结果显示,QQTZN高、中、低剂量组β细胞数量比模型组增多,胰岛素表达较模型组明显增强;α细胞数量比模型组减少,胰高血糖素表达较模型组明显降低。 上述结果表明,QQTZN可以通过增加胰岛素敏感性,修复链脲佐菌素(STZ)造成的胰岛B细胞损伤,以及调节胰岛Q细胞分泌胰高糖素水平来影响胰岛素发挥正常的生物效应。 2.3.2对胰岛素受体后PI-3K信号传导途径的影响 采用免疫组化技术研究了最优方对肝脏组织IRS-2及PI-3K表达的影响。结果表明,最优方高、中、低剂量组肝脏组织IRS-2表达较模型组明显提高。QQTZN低剂量组与模型组相比PI-3K的表达有明显提高,QQTZN高、中剂量组PI-3K表达与模型组相比有升高的趋势,但无显著差异。 采用RT-PCR产物半定量技术对实验大鼠骨骼肌GluT4mRNA进行了检测,结果表明,QQTZN高、低剂量组GluT4 mRNA表达与模型组相比有显著升高。 从上述结果可以看出,QQTZN可以使IRS-2、PI-3K以及GluT4的表达有不同程度的提高,表明该药可以从多个位点改善胰岛素的信号传导障碍,使胰岛素得以发挥其正常的生理功能,调节糖、脂代谢。 2.3.3对PPARγ调控及其它脂肪源性细胞因子的影响 采用免疫组化技术研究了最优方对肝脏组织PPARγ表达的影响。结果表明,与模型组相比,高、中剂量组有不同程度的增加模型大鼠肝脏PPARγ表达的作用。 采用ELISA法检测了最优方对脂肪组织TNF-α表达的影响。结果显示,QQTZN高、中剂量组有显著降低脂肪中的TNF-α浓度的作用。提示最优方可通过降低TNF-α水平,解除TNF-α对脂肪和肌肉GluT4表达抑制,刺激脂肪分解等作用提高胰岛素敏感性。 采用比色法研究了最优方对血清中FFA含量的影响。结果表明,QQTZN高、中、低剂量组均可显著降低血清中FFA的含量。提示最优方可以通过降低脂毒性对机体的损害而达到调节糖、脂代谢的作用。上述结果表明,QQTZN可增加PPARγ表达,抑制TNF-α及FFA的释放,调节脂代谢,而且可以通过抑制TNF-α、FFA的释放,及改善胰岛素信号传导通路障碍等多条途径增加胰岛素的敏感性,从而对糖代谢进行调节。 本课题的创新点在于: ⒈ 在张学中教授的指导下,将直接实验设计法用于中药有效复方的再优化研究,在考察单味药对药效贡献度的基础上,根据中药复方用药的特点,考虑了多味药交互作用对药效的贡献度,更加符合中医基础理论及用药规律。 ⒉ 本课题研究的是中药复方对糖尿病合并高脂血症的影响,发病机理存在糖代谢紊乱和脂代谢紊乱并存的现象,因此在机理探讨方面,从二者的共同致病因素胰岛素信号传导通路障碍入手,同时考察了对脂肪源性细胞因子的影响,更好的解决了糖、脂共调的问题,为中药干预糖、脂代谢的作用机理研究提供了新的思路。 综上所述,通过本实验研究,在原有效复方芪蓝糖脂宁的基础上凝炼出了药味精良的新复方QQTZN,并在复方优化过程中考察中药交互作用的贡献度,丰富了复方优化的方法。随着数理统计学的发展,将不断有新的方法产生,不断探索更符合中医理论特点的数据处理方法是我们努力的目标。在机理探讨的过程中,通过对胰岛素信号传导通路以及脂源性细胞因子的研究,表明QQTZN从多环节、多靶点影响胰岛素信号传导通路,从而实现糖、脂双调的效果,为中药复方治疗糖尿病合并高脂血症提供了科学证据,具有一定的理论和实践价值。
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