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脾胃湿热证与辅助性T细胞1/2平衡及人类白细胞抗原-Ⅱ类基因多态性的相关研究
中文名称: 脾胃湿热证与辅助性T细胞1/2平衡及人类白细胞抗原-Ⅱ类基因多态性的相关研究
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论文编号: 3101121收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Link between Gastrosplenic Damp-heat Syndrome, Bias in T Helper Type 1 (Th1)/Th2 CD4+T Cell Responses and HLA Class Ⅱ Polymorphisms
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 中医临床基础
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 脾胃湿热证 Th1/Th2细胞平衡 细胞因子 人类白细胞抗原-Ⅱ类 基因多态性 白细胞抗原 湿热证
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论文简介:研究目的: 脾胃湿热作为湿热证的一个常见证型,同时也是中医脾胃理论中的一个重要实证,尤其在南方地区尤为多见,涉及的病种广泛,与消化系统疾病关系最为密切,尤以慢性胃炎占首位。脾为后天之本,脾胃功能的健旺,是保证机体抵御外邪的重要因素。目前研究显示脾胃湿热证患者机体内出现免疫异常,部分细胞因子如IL-2、IL-10、TNF-a 等介导了机体内的炎症反应,局部胃粘膜免疫及体液免疫增强。脾胃湿热证中的局部组织炎症改变及免疫功能紊乱可能与幽门螺杆菌 (Hp)感染及其导致的免疫反应有关,Hp 感染可能启动了胃粘膜局部免疫反应,激活 IFN-γ等细胞因子,诱使周围上皮细胞表达 HIA-Ⅱ类分子,导致辅助性T淋巴(Th)细胞亚群平衡失调,出现Th1 细胞反应占优。在一定程度上,免疫系统可以认为是阴阳平衡的调节系统,免疫调节也相当于是对阴阳平衡的调节。Th1/Th2 细胞平衡包括其功能性的细胞因子之间的相互作用、相互制约在一定程度上体现了机体内阴阳相互对立制约、相互作用。Th1/Th2 细胞平衡与脾胃湿热证的阴阳合邪、正邪相争、阴阳的动态平衡存在着一定的联系。HLA-Ⅱ类基因多态性在一定程度上影响着Th细胞亚群的分化方向和Th 细胞亚群活性及增殖。目前研究显示脾胃与人体免疫系统密切相关,且认为中医证型和体质与 HLA 基因有关,脾虚证可能有一定的免疫遗传学基础,素体脾胃盛衰不同对疾病的易感性及转化存在明显的差异。 因此,通过研究慢性浅表性胃炎和消化性溃疡的脾胃湿热证患者与 Hp 感染的相关性及血清细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ平及 IFN-γ/IL-4 比值的情况,以及脾胃湿热证与 HIA-Ⅱ类基因多态性的相关性,了解脾胃湿热证机体内Th1/Th2细胞免疫平衡状态,寻找脾胃湿热证形成的易感基因,进一步揭示脾胃湿热证的生物学基础及发生机理,探讨脾胃湿热证的形成实质,从而指导临床脾胃湿热证的诊断和治疗。 研究方法: 病例组及对照组均为同时期广东地区籍贯的汉族人,病例组为经胃镜检查诊断为慢性浅表性胃炎及消化性溃疡病人,共57例,来源于广州中医药大学第一附属医院内科病房住院和门诊病人,经辨证分为脾胃湿热证(33例)及脾气虚证(24例)两组;对照组15例,为同时期健康人。采用<'14>C-尿素呼气试验检测病例组的Hp感染;采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定三组血清细胞因子IL-2、IL-4、IL-10 和IFN-γ值,并比较三组细胞因子水平和 IFN-γ/IL-4 比值;采用聚合酶链反应-序列特异性引物 (PCR-SSP)基因分型方法检测三组人全血的 HIA-Ⅱ类基因中的HLA-DRB1 和-DQA1 的等位基因。 结果: 脾胃湿热组 Hp 阳性率显著高于脾气虚组(P<0.05),OR=3.733,显示脾胃湿热证与Hp感染相关。脾胃湿热组和脾气虚组IL-2水平均较正常对照组增高(P<0.05),但脾胃湿热组和脾气虚组IL-2水平比较无显著差异(P>0.05);脾胃湿热组IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4 比值均较脾气虚组和正常对照组显著升高(P<0.05);而脾胃湿热组IL-4水平均较脾气虚组和正常对照组显著降低(P<0.05),但IL-10水平仅较脾气虚组显著降低(P<0.05),而与正常对照组相比无显著差异(P>0.05);脾气虚组IL-10水平较正常对照组显著升高 (P<0.05);另外,Hp(+)组IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值均较Hp(-)显著升高(P<0.05),但是IL-2、IL-4及IL-10 水平两组之间无显著差异 (P>0.05)。DQA1*0103 基因型在脾胃湿热组显著高于正常对照组(P<0.05),OR=4.48,提示 DQA1*0103 与脾胃湿热证相关,但与脾气虚组比较无明显差异;DQA1*0601 基因型在脾胃湿热组显著低于正常对照组及脾气虚组 (P<0.05),但OR=0.156,提示DQA1*0601 与脾胃湿热证的相关度较强。但HIA-DRB1各基因型在三组之间无显著性差异 (P>0.05)。 结论:结果显示慢性浅表性胃炎和消化性溃疡中脾胃湿热证患者和。Hp感染相关,机体出现了Th1/Th2 细胞免疫失衡,以Th1 细胞反应占优势,表现为IL-2、IFN-γ水平的升高,IL-4 水平的降低,IL-10水平的异常,细胞因子网络紊乱。脾胃湿热证中Th1/Th2平衡偏倚,免疫调节失衡,正是机体内阴阳失调、邪正相争、互相消长的体现。脾胃湿热证中IL-2、IFN-γ等促炎细胞因子水平升高,抑炎因子IL-4降低,引起持续的免疫应答,造成炎症病理损害,这与湿热证中热邪致病之性相似;但同时通过IL-10的抗炎作用,从而抑制免疫免疫反应,减缓炎症反应,导致脾胃湿热证病变缓慢。Th1型细胞因子和Th2型细胞因子共同作用,相互制约,导致脾胃湿热证起病缓慢,病势缠绵,这可能是湿热证缠绵难愈的病理机制之一。而Hp感染导致Th1/Th2免疫平衡偏移,也可能造成脾胃湿热证机体内Th1 细胞反应占优的原因之一。脾胃湿热证与HLA-DQA1*0103基因型呈正相关,与HLA-DQA1*0601 呈负相关,脾胃湿热证存在着一定的免疫遗传学基础,DQA1*0103 基因型可能是脾胃湿热证的易感基因,DQA1*0601 可能是脾胃湿热证的保护性基因。正是 HLA-Ⅱ类易感基因通过编码的HLA-Ⅱ类分子识别和结合导致脾胃湿热证的感染因子或抗原刺激物,递呈给Th细胞,调控Th细胞的增殖和分化,影响免疫应答,从而形成脾胃湿热证。这提示脾胃湿热证可能存在着免疫遗传易感因素和病原体等感染的病因,故容易导致“脾土衰弱,失健运之堤防,湿气停聚不化”,再加遭受湿热外邪的入侵,内外合邪,从而诱发免疫应答,导致免疫平衡失讽,细胞因子网络调节紊乱,正是这种免疫异常导致湿热证阴阳失调的病理改变及缠绵难愈的病程变化。
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