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种子蛋白电泳技术
作者:韩堃  时间:2009/1/13 12:53:00  来源:论文天下论文网

    【摘要】:种子蛋白电泳是指通过特定的电泳方法对种子蛋白进行分离和鉴别的一种技术,最常用的是酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A-PAGE)和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。聚丙烯酰胺凝胶电泳作为一种高分辨率的分析鉴定技术,在蛋白质、多肽、核酸等生物大分子的分析中一直广泛使用,通过种子蛋白电泳获得的指纹图谱在测定良种质量(真伪、纯度)防止伪劣种子流入市场,保护我国名、优、特种质资源及育成的知识产权和育种家们的权益等方面,均具有重要意义。
  【关键词】:种子蛋白;凝胶电泳
  1种子蛋白质的分类
  种子蛋白质分为两大类:贮藏蛋白质和“家政”蛋白质。贮藏蛋白质是种子蛋白质的主要成份,它在种子形成发育时期大量合成和积累;在种子萌发时,它又很快被水解并为幼苗早期生长提供还原性的氮源。“家政”蛋白质在种子中的含量较少,但对于维持种子的正常代谢活动却是必不可少的。通常根据蛋白质的溶解性,将种子贮藏蛋白质分为4类:溶于水的清蛋白、溶于盐溶液的球蛋白、溶于醇溶液的醇溶蛋白和溶于酸或碱的谷蛋白。
  2电泳技术简介
  电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团,它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。
  电泳按其分离的原理不同可分为:早期的自由界面电泳、应用最广泛的区带电泳、等速电泳、等电聚焦电泳等。作为品种鉴定的一种快速有效的方法,在20世纪70年代初期,许多农业科学家和种子分析人员就开始通过能够鉴别生物个体之间差异的电泳图谱测定品种间的遗传差异。最初采用同工酶电泳技术,80年代以后电泳方法不断改进才逐渐采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,特别是蛋白质电泳因其具有的良好稳定性和重复性显示出巨大的使用价值。蛋白质电泳指纹图谱包括同工酶和贮藏蛋白,这些蛋白的组成由遗传决定,几乎不受环境影响,其组分差别反映出基因型的不同,且产生的指纹图谱分辨率高、重复性好,因而被作为品种鉴别与分类的“指纹”得到广泛应用。

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[本文关键字] 种子蛋白 凝胶电泳
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