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统计学分析方法确定微波法提取佛手多糖的最佳工艺

统计学分析方法确定微波法提取佛手多糖的最佳工艺

佛手(bergat)又名佛手柑,学名itrus edia l. var.sardatylis (nt) single,为芸香科柑桔属香橼的变种,长论文联盟绿小乔木或灌木[1],是传统的名贵中药,其花、叶和果实均可入药,在临床应用上具有悠久的历史。中医认为佛手具有舒肝理气、止咳化痰、和胃止痛等功效,常用于缓解胃腹胀痛和咳嗽气喘等症状。近年来研究发现,佛手多糖能提高机体免疫功能,在抗肿瘤和抗病毒方面具有广阔的应用前景[2]。因此,越来越引起人们的重视。
  试验设计是考虑如何安排多因素多水平的试验,能合理而高效地获得所需要的试验数据,并用相应的方法分析这些数据,以确定哪些因素的影响是主要的,各因素用什么水平搭配起来对试验的指标是最佳的。试验设计在改进产品配方、降低原料和能源的消耗、提高产品的产量和质量等方面具有广泛的应用。本文以佛手多糖含量为指标,以提取次数、浸提时间、提取功率、料液比为因素,利用正交试验和方差分析方法,通过微波提取,对佛手多糖的提取工艺进行系统研究,确定最佳提取工艺,为合理利用和开发佛手药物资源提供科学依据。
  1 仪器与药品
  仪器:u1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司),xh-200a型微波萃取仪(北京鸿鹄科技发展有限公司),电子天平(赛多利斯科学仪器北京有限公司)。
  药品:佛手(长春药材公司),苯酚(开原化学试剂厂)、葡萄糖(中国药品生物制品检定所,批号:1108332200302,供含量测定用)、浓硫酸(胶州市富田化工有限公司)、乙醇(北京化工厂)等,均为分析纯试剂。
  2 方法与结果
  2.1 方法[3-5]
  2.1.1 佛手多糖的测定方法 以葡萄糖为标准品,采用硫酸-苯酚比色法。
  2.1.2 佛手多糖样品液的制备 精密称取1.0 g干燥至恒重的佛手,分别用95%的乙醇和80%的乙醇回流脱脂除糖,置于微波萃取仪内加水提取,将提取液合并,定容于500 l容量瓶中,即得佛手多糖样品液。
  2.1.3 标准样品液的制备 精密称取14.71 g恒重干燥的无水葡萄糖,放入100 l容量瓶中用水溶解,即得147.1 &u;g/l标准样品液。
  2.1.4 标准曲线的绘制 精密吸取上述标准样品液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 l至10 l容量瓶中,依次加入1.8、1.6、1.4、1.2、1.0 l蒸馏水,再各加1.0 l 6%苯酚试剂,混匀,精密加入5 l浓硫酸,振摇后放置5 in,置沸水浴中加热15 in,立即转入冷水浴中冷却至室温,以蒸馏水为空白,在490 n波长处测定吸光度,以浓度为自变量,吸光度a为因变量,进行一元线性回归,得到标准曲线a = 0.040 8 + 0.211,算得相关系数r = 0.998 5,可见两者有高度相关性。
  2.1.5 佛手多糖样品液的测定 精密吸取佛手样品液1.0 l,按&ldqu;2.1.4&rdqu;项下标准曲线的绘制方法操作。
  2.2 单因素试验的结果
  2.2.1 提取次数对多糖得率的影响 选择提取时间8 in,提取功率550 ,料液比1∶20,提取次数分别为1、2、3、4、5次,多糖得率结果见图1。

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 由图1可见,提取次数2次与3、4、5次相比,样品多糖得率相差不大,故选择2次。
  2.2.2 提取时间对多糖得率的影响 提取次数2次,提取功率550 ,料液比1∶20,提取时间分别为4、6、8、10、12 in,多糖得率结果见图2。
   图2 提取时间对多糖得率的影响
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  由图2可见,当提取时间达到8 in时,多糖得率达到最大。故选择提取时间8 in。
  2.2.3 微波功率对多糖得率的影响 提取次数2次,提取时间8 in,料液比1∶20,提取功率分别为250、400、550、700、850 ,多糖得率结果见图3。
    图3 微波功率对多糖得率的影响
  
  由图3可见,当微波功率达到550 时,多糖得率达到最大值。故选择微波功率550 。
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